18 у швеллер: Швеллер горячекатаный характеристики, свойства – купить швеллер горячекатаный оптом в СПб (Санкт-Петербург) с доставкой по России в компании ЛенСпецСталь

alexxlab | 03.02.1971 | 0 | Разное

Швеллер 18 – все характеристики и ГОСТы горячекатаного изделия + Видео

Швеллер 18 является стальным горячекатаным изделием, причем одним из самых востребованных и универсальных, его используют практически во всех производственных областях. Его не только применяют для возведения и изготовления различных конструкций и оборудования, в строительной индустрии и мостостроении, но и дополнительно производят в специальном исполнении для использования в вагоно- и автомобилестроении. Соответственно, и выпускают швеллерный прокат № 18 по нескольким ГОСТам (трем сортамента и семи технических условий), каждый из которых регламентирует свои требования к определенным характеристикам.

1 Каковы основные типы изделий, согласно ГОСТам?

Швеллер № 18, как отмечалось уже выше, относится к стальным горячекатаным швеллерным изделиям. Весь этот металлопрокат имеет в поперечном сечении правильную выраженную П-образную форму, а его типоразмеры обозначаются не иначе, как номером профиля. Кроме того, все эти горячекатаные изделия (разумеется, включая с профилем № 18) отличаются от всех различных других производимых швеллеров, причем от целого ряда очень сильно, настолько, что спутать их с последними никак нельзя. Разумеется, чтобы легко суметь отличить одну продукцию от другой, нужно иметь хотя бы какое-то базовое представление как о рассматриваемых, так и об остальных швеллерах.

Швеллер 18

С описанием основных характерных отличий между ними можно ознакомиться в 1-ой главе опубликованной на этом сайте статьи о швеллере № 16.

Производят швеллерные профили типоразмера 18 трех основных видов и по соответствующим стандартам сортамента. Эти ГОСТы устанавливают подвиды и сортамент (регламентируемый перечень типоразмеров) изготавливаемых по ним изделий с соответствующими размерами, а также площадью и формой разреза в поперечнике, длиной, массой 1 м, предельными отклонениями от данных величин и рядом иных характеристик, которые разработчиками стандарта были рассчитаны по этим вышеприведенным параметрам, и поэтому зависят от них. Итак, 3 основных типа швеллеров с профилем № 18 и распространяющиеся на них ГОСТы:

• общего назначения и специального – выпускают по стандарту сортамента 8240-97;
• предназначенные для использования в вагоностроении – выпускают по 5267.1-90;
• специальные, применяемые в автомобильной промышленности – выпускают по 19425-74.

Кроме того, на всю эту швеллерную металлопродукцию распространяются еще и другие стандарты – ГОСТы технических условий. С их перечнем можно ознакомиться в конце статьи.

2 Виды и серии швеллеров с профилем № 18

Больше всего видов швеллеров № 18 производят по стандарту 8240. Впрочем, это было очевидно уже из приведенного выше описания основных типов этой металлопродукции. По стандарту 8240 делают 5 видов (серий) стальных горячекатаных изделий. Деление на эти серии произведено по форме и геометрическим размерам сечения в поперечнике швеллеров. Обозначения и названия у этих серий такие:

• У – швеллерные стальные профили с полками, имеющими наклонные внутренние грани;
• П – с полками, имеющими параллельные грани;
• Э – это серия так называемых экономичных швеллеров, у полок которых грани параллельны;
• Л – профили легкой серии, у полок которых грани параллельны;
• С – это серия специальных швеллерных стальных профилей с полками, имеющими наклонные внутренние грани.

Швеллер по ГОСТу

Кроме того, металлопродукция ряда серии производится нескольких видов: в обычном наиболее часто используемом исполнении и в утяжеленном. Профили последних (дополнительных) типов серий отличаются от обычных тем, что у них больше размеры ширины полок и толщины стенок и/или полок. И обозначаются они соответственно: дополнительно маркируются буквами “а” или “б”.

И, таким образом, по стандарту 8240 стальных горячекатаных швеллерных изделий с профилем типоразмера № 18 производят аж 9 типов, то есть серий, которые обозначаются, соответственно: 18У, 18аУ, 18П, 18аП, 18Э, 18Л, 18С, 18Са и 18Сб. И дополнительно швеллеры данного ГОСТа в зависимости от того, какова величина перекоса их полок, делят еще по точности производства на: металлопродукцию высокой категории точности изготовления, повышенной, обычной. Что касается двух остальных основных типов швеллеров с профилем № 18 (стандартов 19425 и 5267.1), то их видов гораздо меньше. Но это и понятно, ведь уже из вышеприведенного короткого описания этих ГОСТов следует, что по ним производят узкоспециализированную продукцию.

Специальные профили для автопромышленности, выпускаемые по стандарту 19425, изготовляют только 2 видов: 18С и 18Са. Эти виды тоже отличаются друг от друга шириной полок и размером толщины стенки. И, помимо этого, изделия подразделяют по точности прокатки на:

• A – профили высокой точности изготовления;
• B – профили обычной точности.

Прокат, предназначенный для вагоностроения и производимый по стандарту 5267.1, выпускают только 1-ой серии – 18B.

3 Размеры, вес и другие характеристики швеллеров по сериям

Ниже даны лишь те характеристики, которые интересуют потребителей в первую очередь: размеры сечения и вес швеллера (масса 1 его м). Эти параметры представлены для всех вышеприведенных серий. Все остальные, представляющие интерес технические характеристики, устанавливаемые вышеуказанными ГОСТами сортамента (5267.1, 19425 и 8240), для каждого из перечисленных типов швеллера с профилем № 18 можно найти непосредственно в самих этих стандартах, обратившись, например, с соответствующим запросом к поисковику интернета.

Металлический швеллер

А по изделиям, которые производятся по ГОСТ 8240, вся эта информация есть в статье сайта “Прокат швеллерного профиля стандарта 8240”.

Размеры швеллеров № 18 следующие. Независимо от серии, а также стандарта сортамента все они производятся с высотой профиля (то есть стенки) 180 мм. Все остальные размеры по каждому ГОСТу и серии:

Серии швеллера № 18	Номинальные размеры сечения в поперечном разрезе (кроме высоты), мм
	Ширина полки	Толщина полки	Толщина стенки	Радиус закругления между стенкой и полками с внутренней стороны	Радиус закругления на кромке полки
				не более
для профилей ГОСТ 8240
18У	70	8,7	5,1	9	3,5
18аУ	74	9,3	5,1	9	3,5
18П	70	8,7	5,1	9	5
18аП	74	9,3	5,1	9	5
18Э	70	8,7	4,8	11,5	3,5
18Л	40	5,6	3,6	8	–
18С	68	10,5	7	10,5	5,3
18Са	70	10,5	9	10,5	5,3
18Сб	100	10,5	8	10,5	5
для профилей ГОСТ 19425
18С	68	10,5	7	10,5	5,3
18Са	70	10,5	9	10,5	5,3
для профилей ГОСТ 5267.1
18В	100	10,5	8	10,5	5

Вес швеллеров № 18 (то есть 1-го их погонного м) по сериям:

• 18У и 18П – 16,3 кг;
• 18аУ и 18аП – 17,4 кг;
• 18Э – 16,01 кг;
• 18Л – 8,49 кг;
• 18С – 20,02 кг;
• 18Са – 23 кг;
• 18Сб и 18В – 26,72 кг.

4 Технические требования к профилям – прочность и качество

Для особо тщательного выбора швеллера характеристик, приводимых в указанных выше стандартах сортамента (5267.1, 19425 и 8240), недостаточно. Все остальные необходимые параметры для профилей следует искать в других ГОСТах. А именно, в стандартах технических условий. Данные документы устанавливают техусловия изготовления этого вида проката (то есть всей горячекатаной стальной швеллерной продукции рассматриваемого типа) и ряда различных других металлоизделий из стали. В этих стандартах перечисляются марки стали, приводятся прочностные (то есть физико-механические), а также иные характеристики и параметры, в том числе все требования к качеству изготовленных изделий и проката.

Стандартов техусловий для швеллерного проката № 18, как отмечалось в начале статьи, всего 7. Каждый из них устанавливает свои определенные требования, обусловленные назначением профиля и условиям, а также способам его применения. Эти стандарты представлены в приведенной ниже таблице. В ней значок “+” означает – данный ГОСТ техусловий распространяется на профили № 18 соответствующего стандарта сортамента.

Швеллеры № 18, производимые по ГОСТ	Стандарты технических условий
	19281-2014	535-2005	27772-2015	Р 55374-2012	6713-91	Р 52927-2015	5521-93
8240	+	+	+	+	+	+	+
19425	+	+	+
5267.1	+

Швеллер г/к 18П 12000 ст.3 ГОСТ 8240-97

Описание

Швеллер горячекатаный 18 (П,У) ст.3 ГОСТ 8240-97

Швеллер г/к 18 (П,У) – изделия сортового проката, используемые для создания межэтажных перекрытий, малых архитектурных форм, укрепления кровли. Производится из углеродистой стали (ст.3) согласно ГОСТ 8240-97. Сортамент включает изделия с размерами от 5 до 40, в исполнении с параллельными гранями полок (П) или с уклоном внутренних граней (У).

Описание

Швеллер г/к 18 (П,У) представляет собой деталь сортового проката с П-образным сечением. Производится методом горячего проката на сортовых станках. Применяется для сооружения металлоконструкций, несущих элементов, а также для увеличения несущей способности высоконагруженных элементов различных сооружений.

Таблица веса швеллера г/к 18 (П,У) ст.3 ГОСТ 8240-97

Номер швеллера, серия У / П	Размеры, мм						Вес 1 мп, кг	Кол-во метров в тонне
	h	b	S	t	R не более	r
18У	180	70	5,1	8,7	9	3,5	16,26	61,5
18П	180	70	5,1	8,7	9	5	16,26	61,5

Сталь Ст.3

Для производства швеллера используется конструкционная углеродистая сталь Ст.3 (сталь обычной прочности). Материал отличается высокой устойчивостью к коррозии, хорошими механическими свойствами, может свариваться разными способами. В основном сталь этого класса применяется для производства несущих/ненесущих конструкционных элементов для сварных и сборных конструкций.

Металл листового и фасонного проката 5 категории применяется для несущих элементов, используемых при переменной нагрузке в конструкциях сварного типа. Может эксплуатироваться в широком температурном диапазоне – от -40°С до +425°С.

В своем составе сталь содержит: углерод – 0,14…0,22%, кремний – 0,05…0,17%, марганец – 0,4…0,65%, медь, никель и хром – до 0,3%, мышьяк – до 0,08%, фосфор и сера – до 0,04 и 0,0% соответственно.

ГОСТ 8240-97

ГОСТ 8240-97 Швеллеры стальные горячекатаные – этот стандарт распространяется на стальные швеллера, выпускаемые по технологии горячего проката. Нормативный документ определяет сортамент швеллеров общего/специального назначения. Высота изделий варьируется в пределах 50…400 мм, а ширина полок 32…115 мм. Стандартом регламентируется форма швеллера, предельные отклонения от нормативных размеров и длина изделий, которые предлагаются потребителю.

ООО Торговый дом «МеталлПромИнвест» является крупнейшим поставщиком металлопродукции в России. Реализуем качественные швеллера от завода производителя по умеренным ценам, как в розницу, так и оптовыми партиями. Готовы выполнить резку в размер, доставить товар заказчику со склада в Челябинске.

Швеллер 18 ГОСТ 8240-97 цена

Швеллер 18 ГОСТ 8240-97

Швеллер – это металлическая балка, выполненная горячим прокатом. Внешний вид напоминает русскую букву «П». Основная верхняя часть называется стенкой. Элементы по краям – полками или плечами.

Изделие применяется в различных сферах промышленности и строительства. Часто их используют для быстрого возведения стеллажей, для армирования бетонных конструкций, при производстве кранов, мостов, вагонов и опор. Чем выше номер швеллера, тем больше выносливость и прочность. Примером наиболее часто применяемой металлической продукции является швеллер 18 ГОСТ 8240-97.

Разновидности швеллеров по габаритам

Существует большое разнообразие изделий, имеющих различные формы и размеры. Дополнительную информацию несет буквенная символика.

У – обозначает наличие уклона в месте пересечения стенки и полок;

П – прямой внутренний угол;

Л и Э – легкая и экономичная серия с параллельными стенками;

С – буква указывает на швеллер стальной спецназначения. Он используется в автомобильной промышленности и изготавливается по ГОСТ 19425-74. Сюда же относятся изделия металлопроката, предназначенные для вагоностроения (ГОСТ 5267.1-90). Имеют буквенное обозначение «В».

Цифровое обозначение швеллеров серии «П»

В зависимости от высоты сортамент швеллеров серии «П» имеет цифровую градацию от 5 до 40 см. От сложности изготовления и затраченного материала зависит конечная цена на швеллер. Самыми популярными и продаваемыми считаются следующие подвиды:

10 П – не подвергается термической обработке, но несмотря на это имеет хорошие механические свойства. Используется для различного вида опор.

12 П – часто используют для возведения конструкций с помощью сварки;

14 П – используются для усиления жесткости в строительных перекрытиях;

18 П – чаще всего применяется для армирования конструкций;

40 П – предназначены для создания проектов, подвергаемых высоким нагрузкам в процессе их использования. Примером может быть строительство морского судна или нефтяного оборудования.

Купить швеллер нужного размера и модификации вы можете через наш сайт. Широкий ассортимент, квалифицированный персонал и приятная стоимость позволят вам быстро сориентироваться и выбрать нужное изделие металлопроката.

Disney закроет 18 телеканалов в Азии

Disney закроет 18 телеканалов в Юго-Восточной Азии и Гонконге, поскольку конгломерат уделяет больше внимания потоковой передаче данных напрямую потребителю. Этот шаг вступит в силу с 1 октября 2021 года.

Многие из каналов, которые должны быть закрыты, присоединились к группе менее трех лет назад в рамках приобретения Disney компании 21st Century Fox. К ним относятся: Fox, Fox Crime, Fox Life, FX и Channel V; киноканалы Fox Action Movies, Fox Family Movies, Fox Movies и Star Movies China; спортивные каналы Fox Sports, Fox Sports 2, Fox Sports 3, Star Sports 1, Star Sports 2; детский канал Disney Channel и Disney Junior; фактические сервисы Nat Geo People и SCM Legend.

Только четыре линейных канала, принадлежащих Disney, выживут: Star Chinese Channel, Star Chinese Movies, National Geographic Channel и Nat Geo Wild.

«В рамках глобальных усилий The Walt Disney Company по переходу к модели D2C-first и дальнейшему развитию наших потоковых сервисов, компания консолидирует свой бизнес Media Networks в основном в Юго-Восточной Азии и Гонконге. Эти усилия помогут нам более эффективно и действенно согласовать наши ресурсы с текущими и будущими потребностями бизнеса », – говорится в заявлении Disney о закрытии.

Disney Plus еще не получил полноценного развертывания в этом регионе. Но в Индонезии, где он был запущен в сентябре прошлого года как Disney Plus Hotstar, и в Сингапуре, где он был запущен в феврале, стриминговый сервис стал хитом.

Disney Plus присутствует на 59 рынках по всему миру и имеет в общей сложности более 100 миллионов платных подписчиков. Он заявил, что рассчитывает выйти на большее количество рынков в регионе, но только определил, что Гонконг произойдет в этом году. Подготовка к запуску в Малайзии в начале этого года была временно приостановлена.

«У Disney и дальше будет сильный медиа-бизнес и развлекательный бизнес в Юго-Восточной Азии и Гонконге, который будет включать в себя наш бизнес, направленный непосредственно на потребителя, студийные развлечения, потребительские товары, игры и издательский бизнес, обслуживая как потребителей, так и партнеров в этом регионе», – сказал представитель компании.

Тем не менее, этот шаг может иметь разрушительные последствия для платформ платного телевидения и спорта в регионе. Каналы Disney и Fox были значительной частью предложения пакетов подписки на платное телевидение, предлагаемых такими компаниями, как SingTel и Starhub в Сингапуре и NowTV от PCCW в Гонконге.Их закрытие с октября может означать понижательное давление на цены на подписку.

Выступая на прошлой неделе на APOS, инвестиционный аналитик Ричард Гринфилд сказал, что пакеты платного телевидения уже подорваны корпоративными стратегиями, которые отдают предпочтение их собственному бизнесу, направленному непосредственно на потребителей, а не продажам программ через операторов кабельного и спутникового телевидения. «Все [вещи], которые волнуют потребителей, не входят в комплект», – сказал Гринфилд. Он особо отметил, что Disney ставит свои лучшие шоу, такие как «WandaVision», на Disney Plus, а не на Disney Channel.

Исследовательская компания Parrot Analytics показала, что во вторую неделю апреля программы Disney Plus составили пять из шести самых просматриваемых шоу в Сингапуре. К ним относятся: «Сокол и Зимний солдат», «WandaVision», «Мандалорец», «Современная семья» Disney / ABC и «Анатомия Грея».

Закрытие пяти спортивных служб также может иметь последствия для сделок, связанных с правами на спорт, и их владельцев. Среди ключевых спортивных предложений каналов – сделки с Формулой-1 и Открытым чемпионатом Австралии по теннису.Открытый чемпионат Франции, Открытый чемпионат Франции и Уимблдон. Disney закрыла свои спортивные каналы на Тайване в 2020 году.

дополнительный экранный ридер

Подробнее о:

Behringer | Не найдено

Введение

Настоящее Лицензионное соглашение с конечным пользователем («Соглашение») является обязательным Соглашением между вами («Конечный пользователь», «вы» или «ваш») и Music Tribe Innovation DK / AS («Компания», «мы», «нас» или «наш»). Настоящее Соглашение регулирует отношения между вами и нами, а также использование вами Программного обеспечения Компании.На протяжении всего Соглашения Конец Пользователь и Компания могут именоваться «Стороной» или вместе «Сторонами».

Если вы используете Программное обеспечение от имени своего работодателя или другой организации («Организация»), для которой приносить пользу вам, использующему программное обеспечение, или тем, кто владеет или иным образом контролирует средства, с помощью которых вы используете или доступа, то термины «Конечный пользователь», «вы» и «ваш» будут применяться совместно к вам как физическому лицу и к Организация.Если вы используете или покупаете лицензию для Организации или от ее имени, вы тем самым подтверждаете, гарантия и завет, что у вас есть право: 1) приобрести лицензию от имени Организации; 2) связывать Организацию условиями настоящего Соглашения.

Загружая, устанавливая, открывая или используя, вы: (a) подтверждаете, что у вас есть все необходимые разрешения и разрешения на доступ и использование; (б) если вы используете Программное обеспечение в соответствии с лицензией, приобретенной организация, доступ и использование которой вы уполномочены этой организацией; (c) признать, что у вас есть прочитали и поняли это Соглашение; (D) подтверждаете, что вы в здравом уме и достигли совершеннолетия (18 лет и старше) для заключения имеющего обязательную силу Соглашения; и (e) принять и согласиться быть юридически связанными условия настоящего Соглашения.

Если вы не согласны с этими условиями, не загружайте, не устанавливайте, не открывайте и не используйте программное обеспечение. Если у вас уже есть загрузив программное обеспечение, удалите его со своего вычислительного устройства.

Программное обеспечение предоставляется по лицензии, а не продается вам компанией Music Tribe для использования в строгом соответствии с условиями. настоящего Соглашения.

Лицензия

В соответствии с условиями настоящего Соглашения и, если применимо, условиями, предусмотренными в Лицензионном соглашении, Music Tribe предоставляет вам ограниченную, неисключительную, бессрочную, отзывную и непередаваемую лицензию на загружать, устанавливать и использовать Программное обеспечение, которым вы владеете или контролируете.

Ограничения

Вы соглашаетесь не делать и не разрешаете другим:

• Лицензировать, продавать, арендовать, сдавать в аренду, назначать, распространять, передавать, размещать, передавать на аутсорсинг, раскрывать или иным образом коммерчески использовать Программное обеспечение или предоставлять Программное обеспечение третьим лицам
• Изменять, создавать производные работы для дизассемблирования, дешифрования, обратной компиляции или обратного проектирования любой части Программное обеспечение
• Удалять, изменять или скрывать любые уведомления о правах собственности (включая любые уведомления об авторских правах или товарных знаках) Музыки. Tribe или его аффилированные лица, партнеры, поставщик или лицензиары Программного обеспечения

Интеллектуальная собственность

Все права интеллектуальной собственности, включая авторские права, патенты, раскрытие патентов и изобретения (будь то патентоспособны или нет), товарные знаки, знаки обслуживания, коммерческие тайны, ноу-хау и другую конфиденциальную информацию, фирменный стиль, торговые наименования, логотипы, корпоративные имена и доменные имена, а также вся репутация связанные с ними производные работы и все другие права (совместно именуемые «Права на интеллектуальную собственность»), которые часть Программного обеспечения, которая в противном случае принадлежит Music Tribe, всегда остается исключительной собственностью Music Tribe (или его поставщиков или лицензиаров, если и когда это применимо).Ничто в этом Соглашении не дает вам (или любая организация) лицензию на права интеллектуальной собственности Music Tribe.

Вы соглашаетесь с тем, что настоящее Соглашение передает ограниченную лицензию на использование прав интеллектуальной собственности Music Tribe исключительно как часть Программного обеспечения (а не независимо от него), и только в течение срока действия лицензии, предоставленной вы ниже. Соответственно, использование вами любых прав интеллектуальной собственности Music Tribe независимо от Программное обеспечение или выходящее за рамки настоящего Соглашения считается нарушением Music Tribe Права интеллектуальной собственности.Это не ограничивает; тем не менее, любые претензии Music Tribe о нарушении контракта в случае нарушения вами условий настоящего Соглашения. Вы должны использовать самые высокие стандарты заботиться о защите всего Программного обеспечения (включая все его копии) от нарушений, незаконного присвоения, кражи, неправомерного использования, или несанкционированный доступ. За исключением случаев, явно оговоренных в настоящем Соглашении, Music Tribe оставляет за собой и сохраняет все права, титул и интерес к Программному обеспечению, включая все авторские права и объекты авторского права, товарные знаки и товарный знак, патенты и патентоспособные объекты, коммерческие тайны и другие интеллектуальные права собственности, зарегистрированные, незарегистрированные, предоставленные, запрошенные или оба уже существующие и которые могут быть созданный, относящийся к нему.

Вы (или Организация, если и где это применимо) сохраняете за собой право собственности на все Права интеллектуальной собственности в отношении рабочие продукты, которые вы создаете с помощью Программного обеспечения или с его помощью.

Ваши предложения

Любые отзывы, комментарии, идеи, улучшения или предложения (совместно именуемые «Предложения»), предоставленные вами Music Tribe в отношении Программного обеспечения остается единственной и исключительной собственностью Music Tribe.

Music Tribe может свободно использовать, копировать, изменять, публиковать или распространять Предложения для любых целей и в любым способом без каких-либо кредитов или какой-либо компенсации вам.

Модификации программного обеспечения

Music Tribe оставляет за собой право изменять, приостанавливать или прекращать, временно или постоянно, Программное обеспечение или любой сервис, с которым он связан, с уведомлением или без него и без ответственности перед вами.

Обновления программного обеспечения

Music Tribe может время от времени предоставлять улучшения или улучшения функций / функций Программное обеспечение, которое может включать исправления, исправления ошибок, обновления, обновления и другие модификации («Обновления»).

Обновления

могут изменять или удалять определенные функции и / или функции Программного обеспечения. Вы соглашаетесь с тем, что Музыка Tribe не обязана (i) предоставлять какие-либо Обновления или (ii) продолжать предоставлять или включать какие-либо функции и / или функциональные возможности Программного обеспечения для вас.

Стороннее программное обеспечение

Стороннее программное обеспечение и данные («Стороннее программное обеспечение») могут быть прикреплены к Программному обеспечению. Вы признаете и соглашаетесь с тем, что, если вы хотите получить стороннее программное обеспечение на других условиях, вам следует приобрести это стороннее программное обеспечение. Программное обеспечение напрямую от поставщиков.

Ни при каких обстоятельствах такие отдельные лицензионные соглашения или дополнительные условия между Вами и Поставщик должен иметь обязательную силу для Компании или налагать какие-либо дополнительные обязательства или обязательства, несовместимые с условия настоящего Соглашения, в любом случае с Компанией.

Сторона, предоставляющая стороннее программное обеспечение, несет ответственность по любой гарантии или ответственности, связанной с Стороннее программное обеспечение. MG-IP не несет ответственности за Стороннее программное обеспечение или его использование вами.

Срок действия и прекращение действия

Настоящее Соглашение остается в силе до тех пор, пока не будет расторгнуто вами или Music Tribe.

Music Tribe может по своему усмотрению в любое время и по любой причине или без таковой приостановить или прекратить Соглашение с предварительным уведомлением или без него.

Настоящее Соглашение будет немедленно прекращено без предварительного уведомления Music Tribe, если вы не соблюдаете любое положение настоящего Соглашения.Вы также можете расторгнуть настоящее Соглашение, удалив Программное обеспечение и все их копии с вашего компьютера.

После прекращения действия настоящего Соглашения вы должны прекратить любое использование Программного обеспечения и удалить все копии Программное обеспечение с вашего компьютера.

Прекращение действия настоящего Соглашения не ограничивает какие-либо права Music Tribe или средства правовой защиты по закону или справедливости в случае нарушения вами (в течение срока действия настоящего Соглашения) любого из ваших обязательств по настоящему Соглашению.

Компенсация

Вы соглашаетесь освободить, защитить и обезопасить Music Tribe и ее должностных лиц, директоров, сотрудников, агентов, аффилированных лиц, правопреемников и правопреемников в отношении любых убытков, убытков, обязательств, недостатков, требований, действия, судебные решения, урегулирования, проценты, вознаграждения, пени, штрафы, издержки или расходы любого рода, включая разумные гонорары адвокатам, возникающие в связи с: (i) использованием вами или неправильным использованием Программного обеспечения; (ii) ваш несоблюдение любого применимого закона, постановления или постановления правительства; (iii) нарушение вами этого Соглашение; или (iv) ваше Соглашение или отношения с Организацией (если применимо) или любой третьей стороной.Кроме того, вы соглашаетесь с тем, что Music Tribe не несет ответственности за информацию или контент, которые вы отправляете. или сделать доступным через это Программное обеспечение или контент, который предоставляется вам третьими сторонами.

Нет гарантий

Программное обеспечение предоставляется вам «Как есть» и «Как доступно», со всеми ошибками и дефектами без гарантии любой. В максимальной степени, разрешенной действующим законодательством, Music Tribe от своего имени и от имени своих аффилированных лиц и их соответствующих лицензиаров и поставщиков услуг, прямо отказывается от всех гарантий, явные, подразумеваемые, установленные законом или иным образом в отношении Программного обеспечения, включая все подразумеваемые гарантии товарной пригодности, пригодности для определенной цели, права собственности и ненарушения прав, а также гарантий, которые могут возникнуть вне деловых отношений, поведения, использования или торговой практики.Без ограничения вышеизложенного, Music Tribe не предоставляет никаких гарантий или обязательств и не делает никаких заявлений о том, что Программное обеспечение будет соответствовать вашим требованиям, достигать желаемых результатов, быть совместимым или работать с любым другим программным обеспечением, системы или службы работают без перебоев, соответствуют любым стандартам производительности или надежности или являются ошибочными бесплатно или что любые ошибки или дефекты могут или будут исправлены.

Без ограничения вышеизложенного, ни Music Tribe, ни какой-либо поставщик Music Tribe не делает никаких заявлений. или гарантии любого рода, явные или подразумеваемые: (i) в отношении работы или доступности Программного обеспечения или информация, контент и материалы или продукты, включенные в него; (ii) что Программное обеспечение будет бесперебойно или без ошибок; (iii) относительно точности, надежности или актуальности любой информации или контента, предоставленного через Программного обеспечения; или (iv) что Программное обеспечение, его серверы, контент или электронные письма, отправленные от или от имени Music Tribe, являются без вирусов, скриптов, троянских программ, червей, вредоносных программ, бомб замедленного действия или других вредоносных компонентов.

В некоторых юрисдикциях не допускается исключение или ограничение подразумеваемых гарантий или ограничений на применимые законные права потребителя, поэтому некоторые или все вышеперечисленные исключения и ограничения могут не применяться тебе.

Ограничение ответственности

Несмотря на любые убытки, которые вы можете понести, вся ответственность Music Tribe и любого из ее поставщиков в соответствии с любым положением настоящего Соглашения, и ваше исключительное средство правовой защиты в отношении всего вышеизложенного будет ограничиваться сумма, фактически уплаченная вами за Программное обеспечение.

В максимальной степени, разрешенной применимым законодательством, ни при каких обстоятельствах Music Tribe или его поставщики не несут ответственности за любые особые, случайные, косвенные или косвенные убытки (включая, но не ограничиваясь, убытки) за упущенную выгоду, за потерю данных или другой информации, за прерывание бизнеса, за телесные повреждения, за потерю конфиденциальность, возникающая в результате или каким-либо образом связанная с использованием или невозможностью использования Программного обеспечения, стороннего программного обеспечения и / или стороннее оборудование, используемое с Программным обеспечением, или иным образом в связи с любым положением настоящего Соглашения), даже если Music Tribe или любой поставщик были уведомлены о возможности таких убытков и даже если средство не достигает своей основной цели.

Некоторые штаты / юрисдикции не допускают исключения или ограничения случайных или косвенных убытков, поэтому вышеуказанное ограничение или исключение может не относиться к вам.

Делимость

Если какое-либо положение настоящего Соглашения будет признано не имеющим исковой силы или недействительным, такое положение будет изменено и интерпретируется для достижения целей такого положения в максимально возможной степени в соответствии с применимыми закон и остальные положения сохранят полную силу.

Отсутствие неисполнения или задержки в осуществлении со стороны любой из сторон любого права или каких-либо полномочий в соответствии с настоящим Соглашение действует как отказ от этого права или полномочий. Ни одноразовое, ни частичное осуществление какого-либо права или полномочия по настоящему Соглашению препятствуют дальнейшему осуществлению этого или любого другого права, предоставленного в настоящем Соглашении. В случае о конфликте между настоящим Соглашением и любыми применимыми условиями покупки или другими условиями, условиями настоящего Соглашения. управляет.

Поправки к настоящему Соглашению

Music Tribe оставляет за собой право по своему усмотрению изменять или заменять настоящее Соглашение в любое время. Если изменение является существенным, мы направим уведомление не менее чем за 30 дней до вступления в силу любых новых условий. Что представляет собой существенное изменение, будет определяться по нашему собственному усмотрению.

Продолжая получать доступ к нашему Программному обеспечению или использовать его после вступления в силу любых изменений, вы соглашаетесь соблюдать пересмотренные условия.Если вы не согласны с новыми условиями, вы больше не имеете права использовать Программное обеспечение.

Применимый закон

Законы юрисдикции, в которой вы являетесь резидентом, за исключением норм коллизионного права, регулируют любые спор, возникающий из или в связи с этим Eula. Применимость Единого коммерческого кодекса (UCC) и любые другие законы, регулирующие применение законов любых других юрисдикций, прямо исключены.

Изменения к настоящему Соглашению

Мы оставляем за собой исключительное право время от времени вносить изменения в настоящее Соглашение.Ваш постоянный доступ к и использование программного обеспечения означает ваше согласие с условиями и условия опубликованы в такое время. Вы подтверждаете и соглашаетесь с тем, что принимаете настоящее Соглашение (и любые поправки к нему) каждый раз, когда вы загружаете, получаете доступ или используете программное обеспечение.

Поэтому мы рекомендуем вам регулярно просматривать это Соглашение.

Если в течение 30 (тридцати) дней после публикации изменений или дополнений к настоящему Соглашению вы решите, что не согласны с обновленными условиями, вы можете отозвать свое согласие с измененными условиями, предоставив нам письменное уведомление о вашем отказе.

Отсутствие работы или агентских отношений

Никакие положения настоящего Соглашения или какие-либо части отношений между вами и Music Tribe не предназначены для создания, они также не должны рассматриваться или толковаться как создание каких-либо отношений между вами и Music Tribe, кроме конечного пользователя программного обеспечения и предоставляемых услуг.

Справедливая помощь

Вы признаете и соглашаетесь с тем, что нарушение вами настоящего Соглашения нанесет непоправимый ущерб Music Tribe для одних только денежных возмещений будет недостаточно.В дополнение к возмещению ущерба и любым другим средствам правовой защиты, которым Вы признаете и соглашаетесь с тем, что Music Tribe может иметь право добиваться судебного запрета, чтобы предотвратить фактическое, угрожающее или продолжающееся нарушение настоящего Соглашения.

Ограничение времени для подачи претензий

Любые основания для исков или претензий, которые могут возникнуть в связи с настоящим Соглашением, должны быть начат в течение одного (1) года после возникновения причины иска, в противном случае такая причина иска или требования заблокирован навсегда.

Полнота соглашения

Соглашение представляет собой полное соглашение между вами и Music Tribe относительно использования вами Программное обеспечение и заменяет все предшествующие и одновременные письменные или устные споры между вами и Музыкальное племя.

На вас могут распространяться дополнительные положения и условия, которые применяются при использовании или покупке другой Музыки. Услуги Tribe, которые Music Tribe предоставит вам во время такого использования или покупки.

Свяжитесь с нами

Не стесняйтесь обращаться к нам по адресу [email protected], если у вас есть какие-либо вопросы по этому Соглашению.

Это конец эпохи: 18-й канал отменяет международный формат, который обслуживал поколения иммигрантов из Лос-Анджелеса.

Ночь за ночью Пол Хо сидел в одном кресле, положив голову на ту же подушку, когда он настраивался на китайский язык. выпуск новостей на канале 18.

Житель Восточного Лос-Анджелеса назвал шоу KSCI с ведущими Гарри Чангом и Кристин Чанг «моим десертом» после еды.

«Я наблюдал за ними, чтобы понять Азию и Америку, и рекламные ролики могут показать мне, где поесть или купить страховку», – сказал 63-летний бывший бухгалтер. «Они часть нашей семьи».

Армянская фолк-певица Нуне Есаян выступает в 2006 году на KSCI-TV.

(Myung J. Chun / Los Angeles Times)

Более 30 лет канал 18 служил телеканалом Организации Объединенных Наций в городе иммигрантов, отчаянно нуждающихся в программах на своих языках.Радиостанция транслировала эклектичный набор шоу, в которых освещались такие темы, как музыка, спорт, путешествия и религия.

В разное время он предлагал контент на 14 азиатских языках, включая японский, вьетнамский и тагальский, а также на испанском, хинди, арабском, армянском, персидском, иврите, французском, немецком, венгерском, итальянском и русском языках.

Но это многонациональное одеяло подходит к концу в субботу, когда 18-й канал переключает форматы и начинает транслировать информационные ролики на английском языке.

Официальные лица мало публично говорили о причинах изменения. В последние годы телеканал боролся с трудностями и в 2012 году подал заявление о банкротстве.

Эксперты также быстро отмечают, что типы программ, которые предлагает канал 18, теперь широко доступны в Интернете, кабельном телевидении и через прокат видео.

В прошлом KSCI «мог быть единственным местом, куда аудитория могла пойти для определенных видов развлечений на азиатском языке», – сказала Лена Чао, профессор коммуникативных исследований в Cal State L.А. «Теперь люди могут ходить в видеомагазины и брать мыльные оперы пачками».

Ведущие новостей 18 канала Гарри Чанг и Кристин Чианг (справа) ведут последнюю передачу KSCI-TV в пятницу в Лос-Анджелесе.

(Мел Мелкон / Лос-Анджелес Таймс)

Но даже с учетом того, что иммигрантам доступно больше возможностей, Чао сказал, что потеря 18-го канала «душераздирающая», потому что радиостанция сосредоточила так много внимания на новостях и информации об азиатской культуре и обществе.

«Когда основные новости освещают азиатов, это всего лишь вспышка», – сказала она. «У нас уже такая небольшая доля рынка. Теперь азиатское покрытие еще больше сокращается ».

Канал 18 был любим поколениями вновь прибывших в Лос-Анджелес, потому что многие считают, что он действует как общественная услуга для общества.

Формат появился в 1976 году, и официальные лица заявили, что это первая станция в США, которая транслирует программы на стольких разных языках.

Он заключил сделку по трансляции Олимпийских игр 1988 года в Сеуле на корейском языке.Во время кризиса на площади Тяньаньмэнь в 1989 году станция добавила прямую трансляцию на мандаринском диалекте.

Когда в 1992 году вспыхнули беспорядки в Лос-Анджелесе, станция вела прямую трансляцию на нескольких языках. Он проводил аналогичные одновременные трансляции для дебатов кандидатов, а также предлагал информацию о защите потребителей и правах иммигрантов.

Операторы 18-го канала тогда заявили, что их миссия – помочь иммигрантам ассимилироваться в обществе путем их информирования и развлечения.

На протяжении многих лет радиостанция занималась спорными вопросами, включая СПИД, половое воспитание, международные конфликты и расовые отношения.

Гарри Чанг обнимает свою со-ведущую Кристин Чанг после их последней трансляции в пятницу.

(Мел Мелкон / Лос-Анджелес Таймс)

«Каждый раз, когда я ставлю свое шоу, я пытаюсь научить иранцев, на что следует обращать внимание в этой стране», – сказал The Times ведущий ток-шоу для персов из Лос-Анджелеса в 1989 году. «Когда все закончится, если они не захотят». Я ничему не научился, тогда я не называю это шоу ».

Конец покрытия для азиатского сообщества – это как «потерять друга, которого приветствовали в вашей гостиной», – говорит Минан Тивари, опекун банка на пенсии из Глендейла.Индийский иммигрант из Бомбея является поклонником Diya TV, единственной национальной сети телевещания, обслуживающей индийско-американское сообщество, уделяя большую часть своих новостей таким общественным деятелям, как премьер-министр Индии Нарендра Моди, и транслирует такие болливудские фильмы, которые, по словам Тивари, он использовал. смотреть как ребенок.

«Где еще я могу это получить?» – спросил 70-летний Тивари. «Эти деловые люди не заботятся о нас со стороны аудитории. Лос-Анджелес – одна из крупнейших экономик мира, и мы остались без необходимого нам телевидения.Почему?”

Рави Капур, индийский американский владелец телеканала Diya TV, сказал, что его передачи были прекращены несколько недель назад.

«Мы получаем отзывы от людей, которые скорбят, потому что не знают, куда еще обратиться», – сказал он.

Деннис Дэвис, генеральный директор станции, не ответил на запросы о комментариях.

Источники в компании, в том числе в руководстве, сообщили, что в мае они были уведомлены о отключении, а позже узнали об участии станции в прибыльном аукционе на ее спектр.

Джек Сонг, тайваньский иммигрант, выросший в Аркадии, сказал, что его семья обычно «включает телевизор в 19:00. и мы будем пристально следить за любыми последними новостями ».

Для них KSCI, вещающая на цифровых каналах, «казалась беспристрастной и предлагала выборным должностным лицам важный инструмент для охвата избирателей-иммигрантов», – добавил специалист по связям с общественностью.

Сонг, 35 лет, сказал, что для его родителей и других людей, которые могут говорить на одном языке и «чувствовать себя изолированными от мейнстрима», просмотр шоу «помогло понять, что вы не одиноки.

Клейтон Дьюб, директор американо-китайского института в USC, сказал, что даже в условиях сокращения размеров СМИ – по мере того, как рекламодатели мигрируют в Интернет, минуя традиционные платформы печати и вещания, – изменение программирования «застало многих людей врасплох».

Часто в 22:00 Дьюб приходил домой с работы и смотрел ретрансляцию новостей в прайм-тайм на китайском языке. Он и его жена Сяовэй поселились в Южном заливе, и она знала, когда не следует звонить родителям каждый вечер во время телевизионного эфира, «потому что они настроены религиозно», – сказал он.

«Если бы мы спросили их:« Где вы хотите поесть в эти выходные? », Они бы сослались на ресторан, рекламируемый на 18 канале», – вспоминал он. «Это радиостанция, которая не только передавала новости из их родной страны Китая, но и новости с соседних улиц, чтобы все понимали новый мир, в котором они жили».

Дьюб сказал: «Это очень печальный день для бесчисленных зрителей, которые зависят от глубины своей информации, чтобы знать, что происходит – не только в их родных странах, но прямо здесь, в Лос-Анджелесе, где это так оживленно.Кто еще может заниматься азиатским программированием в такой степени? »

В пятницу сотрудники собрались, чтобы сделать групповое селфи после финального выпуска новостей на китайском языке, обниматься и приветствовать. Ведущие, Чанг и Чан, попросили коробку салфеток перед выпуском последнего выпуска новостей.

Через двадцать минут Чан заплакал в прямом эфире, когда они делали ретроспективу прошлых репортажей. Затем они поблагодарили зрителей за настройку. Начиная с субботы, новые программы будут включать ограниченный корейский контент от международных участников.

«Многие люди, впервые приехавшие в Лос-Анджелес, возможно, чувствовали себя потерянными, но мы пытались поделиться информацией, которая могла бы им помочь», – сказал Чан.

«Мне жаль, что я больше не могу их видеть каждый вечер», – сказал Чанг. «Но если я встречу их в любом уголке города, я хочу, чтобы они поздоровались».

[email protected]

Twitter: @newsterrier

ТАКЖЕ

Судья по делу о сексуальном насилии в Стэнфорде предлагает первую защиту своего решения

Л.A. отвергает активистов арендаторов, позволяет квартирам в Беверли Гроув превратиться в кондоминиумы

«У нас беда!» Небольшой самолет разбивается на автостраде 405 в округе Ориндж

Смотреть ИСТОРИЮ Полные серии и видео онлайн

Смотреть историю Эпизоды и видео онлайн | Исторический канал

Полная серия

• Выкованные в огне

  S8 E29

  Вышла 21 Июл 2021

• Книга секретов Америки: специальное издание

  S2 E1

  Вышла 20 Июл 2021

• Человек против истории

  S1 E1

  Вышла 20 Июл 2021

• Книга секретов Америки

  S4 E10

  Вышла 20 Июл 2021

• Американские сборщики

  S22 E17

  Вышла 19 Июл 2021

• Машины, построившие Америку

  S1 E2

  Вышла 18 Июл 2021

• Машины, которые построили Америку

  S1 E1

  Вышла 18 Июл 2021

• Горные мужчины

  S10 E7

  Вышла 15 Июля 2021

• Один

  S8 E7

  Вышла 15 Июля 2021

• Выкованные в огне

  S8 E28

  Вышла 14 Июля 2021

• Тайна ранчо оборотней

  S2 E10

  Вышла 13 Июл 2021

• Книга секретов Америки

  S4 E9

  Вышла 13 Июл 2021

• Один

  S8 E6

  Вышла 08 Июля 2021

• Горные мужчины

  S10 E6

  Вышла 08 Июля 2021

Создайте профиль, чтобы добавить это шоу в свой список!

Начать

PGA Championship 2021 прямая трансляция, смотреть онлайн: телепрограмма, канал, репортаж Фила Микельсона в воскресенье

Getty Images

История вполне может быть сделана в воскресенье на Ocean Course на острове Киава, поскольку Фил Микельсон надеется стать самым старым крупным чемпионом в истории.Это была основная сюжетная линия финального раунда чемпионата PGA 2021 года, но возвращение Микельсона к вершине было одним из немногих интересных моментов, когда он попадал в последние 18 лунок на одном из самых живописных полей страны.

Брукс Коепка отбил всего один бросок от Микельсона, выходящего в финальный раунд воскресенья, и даже вывел его в счете поздно вечером в субботу. Четырехкратный крупный победитель стремится завоевать свой третий чемпионский титул PGA за последние четыре года и возглавляет таблицу коэффициентов второй день подряд.Луис Остхёйзен рассчитывает на свою вторую крупную победу, а 42-летний футболист вышел в воскресенье всего на два броска от Левти, с которым он разделил лидерство на 36 лунок в субботу.

Но в центре внимания действительно Микельсон, который стремится стать 14-м человеком, выигравшим шесть крупных турниров, и самым старым игроком, когда-либо завоевавшим корону на этом уровне. Wanamaker Trophy полностью готов к розыгрышу в воскресенье, и Левти – с его большими блестящими очками – ожидает возвращения к славе, которую он не испытывал на протяжении большей части десятилетия.

Микельсон и Коепка боролись за позицию в первые несколько лунок в воскресенье, и неизвестно, как закончится раунд. Независимо от того, что происходит, у Левти до сих пор был изюминкой мейджора с огромной дырой на песчаном участке в начале своего четвертого раунда.

За воскресеньем предстоит так много всего, что временами оно может быть подавляющим. Без проблем. Мы вас прикрыли. Ознакомьтесь с полным набором тайм-таймов 4-го раунда, чтобы знать, когда смотреть своих любимых игроков в гольф, и следите за таблицей лидеров 4-го раунда в прямом эфире.

Не пропустите наш график трансляции чемпионата PGA, чтобы вы могли спланировать свое воскресенье в районе второго мейджора в году, и не забудьте посмотреть прямые трансляции четвертого раунда чемпионата PGA в выходные на CBSSports.com, в приложении CBS Sports и Paramount +

Часовой пояс Восточный

Раунд 4 – воскресенье, 23 мая

Время начала 3 раунда: 7:30 [время игры PGA]

Прямая трансляция чемпионата PGA: 8:00 до 19:00 .м. по ESPN +

• Избранные группы – с 8:00 до 19:00.
• лунки 16-18 – с 12:00 до 19:00

Ранние телетрансляции: с 10 до 13 часов. на ESPN, ESPN +
Prime TV покрытие: 13-19 вечера. на CBS
TV одновременная прямая трансляция: 13-19 вечера на CBSSports.com, CBS Sports App, Paramount +

Как смотреть «Большого брата» сегодня вечером (18.07.21): время, канал, прямая трансляция

В семье «Большого брата» осталось 15 человек после выселения Трэвиса в четверг.

Новым главой семьи является Киланд, который первоначально был выдвинут на выселение Френчи, первым главой семьи в этом сезоне.

«Большой брат» выйдет в эфир в 20:00. Воскресенье, 18 июля, на CBS. Поклонники могут смотреть прямые трансляции на Paramount +.

Сегодня мы узнаем, кого Киланд выдвинул для следующего выселения в четверг, 22 июля.

Кайланд Янг станет следующим главой семьи в «Большом брате» на CBS. Киланд объявит в воскресенье, 18 июля, кого он выдвигает для выселения.(CBS) © 2021 CBS Broadcasting, Inc. Все права защищены CBS

Остальные гости:

• Алисса Лопес, 24 года, дизайнер купальных костюмов из Сарасоты, Флорида,
• Аза Авасм, 30 лет, директор по продажам из Балтимора, Мэриленд
• Брент Шампань, 28 лет, бортпроводник из Крэнстона, Род-Айленд
• Бритини Д’Анджело, 24 года, воспитатель детского сада из Ниагарского водопада, Нью-Йорк
• Кристиан Биркенбергер, 23 года, помощник генерального подрядчика из Харвинтона, Коннектикут
• Клэр Рефусс, 25 лет, инженер искусственного интеллекта из Чагрин-Фоллс, штат Огайо, которая сейчас живет в Нью-Йорке.
• Дерек Фрейзер, 29 лет, сотрудник службы безопасности из Филадельфии
• Дерек Сяо, 24 года, основатель стартапа из Балтимора, который живет в Нью-Йорке, штат Нью-Йорк.
• Брэндон «Френчи» Френч, 34 года, фермер из Камдена, Теннесси, проживающий в Кларксвилле, Теннесси.
• Ханна Чадда, 21 год, аспирантка из Чикаго, Иллинойс.
• Киланд Янг, 29 лет, бухгалтер из Сан-Бернардино Округ, Калифорния, проживающая в Венис-Бич, Калифорния.
• Сара Стигал, 27 лет, судебный эксперт из Бойлинг-Спринг, Южная Каролина, проживающая в Форт-Майерсе, Флорида.
• Тиффани Митчелл, 40 лет, флеботомист из Детройта, штат Мичиган
• Уитни Уильямс, 30 лет, визажист из Портленда, штат Орегон
• Ксавье Пратер, 27 лет, поверенный из Каламазу, штат Мичиган, проживающий в Милуоки, Висконсин

«Большой брат» следует за «группой людей, живущих вместе в доме, оборудованном 94 камерами высокой четкости и 113 микрофонами, которые записывают каждое их движение 24 часа в сутки.

Каждую неделю кто-то будет исключен из дома, а последний оставшийся гость получит главный приз в размере 500 000 долларов.”

Гости делятся на четыре команды, каждая со своим капитаном.

Команды:

Тузы – Уитни капитан, Брент, Дерек Икс и Ханна

Короли – Кристиан капитан, Алисса, Ксавье и Сара

Куинс – Клэр капитан, Килэнд и Тиффани (Трэвис был в этой команде. )

Джокеры – Френчи капитан, Аза, Бритини и Дерек Ф.

Направленное коллективное движение бактерий при ограничении каналов

Распространение и выживание популяций бактерий часто зависит от их способности вести себя коллективно: клетки собираются в стаи для поиска и мигрируют к богатым питательными веществами регионам [1, 2], организуются в биопленки, устойчивые к антибиотикам [3, 4], реагируют на голод, создавая плодовые тела [5, 6], или выбирают каннибализм [7].В таких организациях окружающая среда часто играет важную роль благодаря своему химическому составу [2, 3] или геометрическим ограничениям [4, 8]. Сложный и увлекательный вопрос заключается в том, как различные химические или механические взаимодействия между микроорганизмами и окружающей их средой могут управлять сложной динамикой популяций.

Теоретические подходы к этому вопросу могут использовать методы из развивающейся области «активной материи», в которой мотивация заимствована из коллективного поведения в суспензиях жгутиковых бактерий (например,g., Escherichia coli и Bacillus subtilis ) [9–16], а также те, которые состоят из молекулярных моторов и нитей, по которым они движутся [17, 18]. Используя дискретные [19], континуальные [20] и феноменологические модели, в этой растущей области исследований изучалась самоорганизация популяций взаимодействующих подвижных организмов или других видов активных и ведомых объектов, часто приводящая к поразительному коллективному поведению. Недавние исследования предсказали, что физическое ограничение может иметь сильное влияние на пространственно-временную организацию и действительно может приводить к однонаправленным потокам [21–26].Однако экспериментальные реализации замкнутого активного вещества остаются относительно редкими [14–16, 27–30].

Взаимодействия между плавающими клетками в бактериальных суспензиях имеют два основных компонента: прямое стерическое отталкивание и дальнодействующие гидродинамические силы, создаваемые действием множества жгутиков. Эти взаимодействия приводят к сложному коллективному движению: в то время как прямое отталкивание между палочковидными бактериями производит локальное выравнивание, подобное упорядочению нематических жидких кристаллов, гидродинамические силы могут адвектировать и переориентировать близлежащие бактерии [31–33] и сильно усиливают макроскопические турбулентные паттерны, такие как струи и завихрения. быстрее, чем отдельная бактерия [9–11].Тем не менее, эти коллективные структуры не являются постоянными, вместо этого они повторяющиеся и переходные .

Предыдущие эксперименты были успешными в управлении миграцией бактерий с помощью градиентов хемоаттрактантов [1, 2] или путем изменения свойств внешнего потока и окружающей среды [34]. Альтернатива, которую мы рассматриваем здесь, использует преимущества интерфейсов, которые обычно встречаются в среде обитания бактерий, такой как почва. Недавние исследования объяснили, как отдельный микроорганизм взаимодействует с поверхностями [33, 35], но мало что было сделано для экспериментального изучения коллективной динамики подвижных бактерий и других типов активного вещества в ограниченном пространстве [14–16, 27, 30].Различные интерфейсы (текучие, твердые) или ограничивающие топологии (например, плоские, линейные, круговые) могут привести к различным макроскопическим организациям.

Здесь мы описываем экспериментальную установку, способную стабилизировать плотную суспензию Bacillus subtilis в постоянный поток только посредством физического ограничения. Как показано на рисунке 1, бактерии вводятся в массив тонких периодических беговых дорожек миллиметровой длины, что позволяет количественно оценить многие реализации результирующих структур потока.Наш главный вывод состоит в том, что существует явный переход от «турбулентного» состояния к стабильной циркуляции для ширины канала или масштаба, сопоставимого с длиной корреляции ориентаций ячеек, или, что эквивалентно, диаметром характерных завихрений, наблюдаемых в эффективно неограниченных суспензиях [9, 10, 36]. Численные исследования дискретной модели пловцов, которая включает как стерические, так и гидродинамические взаимодействия между клетками, показывают, что в движении суспензии доминирует поток жидкости, управляемый бактериями.В частности, клетки, близкие к ограничивающим стенкам, создают сильный поток жидкости, который адвектирует клетки в объеме канала против направления их плавания, подобно тому, как это наблюдается в круговых каплях суспензии [14, 15]. Анализ кинетики суспензии проливает свет на механизм, который управляет коллективным поведением бактерий. Эта организация демонстрирует сильную связь с предыдущими работами по перекачиванию бактерий в микрофлюидные камеры [37] и плаванию или выравниванию клеток против сдвигового потока жидкости [34, 38–41].

Приблизить Уменьшить Сбросить размер изображения

Рис. 1. Экспериментальная установка. (а) Схема всего микрожидкостного контура. Бактерии вводятся через входное отверстие, которое перед записью закрывается. (б) Деталь одной беговой дорожки в устройстве камеры PDMS. Стрелка указывает одно из двух эквивалентных направлений спонтанного кровообращения. (c) Тираж крупным планом. Стрелки: мгновенное поле бактериального потока, измеренное с помощью PIV.

Загрузить рисунок:

Стандартный образ Изображение высокого разрешения

2.1. Эксперименты

Плотную суспензию подвижного B. subtilis (дикого типа, штамм 168) готовили из ночной культуры, разводили в 200 раз свежим бульоном Terrific Broth (TB, Sigma) и инкубировали при 35 ° C в течение часа. Когда бактерии достигли фракции с высокой подвижностью (подвижные клетки), мл суспензии концентрировали центрифугированием (g, мин), и осадок использовали в экспериментах без дальнейшего разбавления.Мы оцениваем объемную долю ячейки как.

Полидиметилсилоксановые микрокамеры (PDMS) были изготовлены с беговыми дорожками (высокие, 20–130 мкм шириной м и длиной более 1 мм, рис. 1 (а)), соединенными тонкими входными отверстиями (широкие). Бактерии были введены в камеру с помощью шприца, и основные входные отверстия были закрыты перед записью, чтобы избежать любого нежелательного движения (визуальный осмотр подтвердил отсутствие какого-либо чистого потока между беговыми дорожками).

Каждому препарату давали возможность достичь устойчивого состояния в течение двух минут, и видео продолжительностью 5 секунд получали с помощью высокоскоростной камеры (Fastcam, Photron, 125 кадров / сек) при ярком освещении поля с использованием масляно-иммерсионного объектива (Zeiss ).Поле скоростей бактерий определялось с помощью скоростной микроскопии изображения частиц (с использованием адаптированной версии mPIV [42]) без усреднения по времени (рисунок 1 (b)). Этот метод дает свойства движения бактерий, а не связанного с ним потока жидкости.

2.2. Измерение бактериальной ориентации

Изображения в светлом поле дают только локальное поле скоростей бактерий и их приблизительное совмещение [14], но не их ориентацию голова-хвост. Чтобы определить взаимосвязь между плаванием и направлениями движения, мы пометили жгутики и мембраны подмножества популяции двумя разными флуорофорами, как описано ранее [15].Мы использовали мутантный штамм amyE :: hag (T209C) DS1919 3610, чей белок жгутика флагеллин (ген hag ) содержит легко маркируемый цистеин [43]. Клетки выращивали в тех же условиях, что и бактерии дикого типа, и метили в соответствии с протоколом Guttenplan et ​​al [43]. мл суспензии центрифугировали (g, мин) и ресуспендировали в фосфатно-солевом буфере (PBS), содержащем 5 мкг мкг / мл ^-1 Alexa Fluor 488 Maleimide (Molecular Probes), и инкубировали при комнатной температуре в течение минут.Этот флуорофор реагирует с цистеином, добавленным к флагеллину. Затем бактерии промывали в мл PBS и ресуспендировали в PBS, содержащем мкг-мл ^-1 FM 4-64 (Molecular Probes). Этот флуорофор встраивается в липидные бислои и маркирует клеточные мембраны. Избыток флуорофора удаляли при последней промывке, и бактерии ресуспендировали в PBS. Затем фракцию меченых мутантов осторожно смешивали с немечеными бактериями дикого типа. Клетки не могут плавать в PBS, в котором отсутствует источник углерода, но восстанавливают свою первоначальную подвижность после переноса в Terrific Broth.

Изображения получали на конфокальном микроскопе с вращающимся диском (Zeiss Axio Observer Z1, камера Photometrics Evolve 512 Delta) со скоростью 6 кадров в секунду. Оба флуорофора возбуждали лазером, и излучение фильтровали с помощью фильтра GFP (барьерный фильтр 500–550 нм, Zeiss) для Alexa Fluor 488 Maleimide и фильтра DsRed (барьерный фильтр 570–640 нм, Zeiss) для FM 4-64. Мы взяли последовательность из трех изображений: мембраны (ложно окрашены в красный цвет), жгутиков (ложно окрашены в зеленый цвет) и снова мембраны (ложно окрашены в синий цвет, рисунок 6) и измерили движение бактерий по смещению мембраны между первым и последним изображениями.Затем мы вывели ориентацию клетки (ее направление плавания) из пучка жгутиков (в задней части клетки) и из среднего положения мембраны относительно этого пучка.

2.3. Моделирование и симуляция

Мы использовали численное моделирование, адаптированное из недавнего метода [15], чтобы понять самоорганизацию подвески. Бактерии представлены в виде подвижных эллипсов, подверженных стерическим и гидродинамическим взаимодействиям и заключенных в периодический канал.Каждый пловец создает диполярное «толкающее» поле потока, и на него влияют возмущения потока жидкости, создаваемые другими пловцами.

Используем двумерную область с периодическими границами длиной L и шириной где – стенки канала. Каждый пловец моделируется как эллипс длины и ширины, описываемый его центром масс и ориентацией. и запускаются случайным образом и следуют динамике [15, 44]:

Уравнение (1) описывает самодвижение с постоянной скоростью (выбранной как) вдоль направления ячейки, адвекцию скоростью жидкости, интерполированной в положении пловца, и попарно стерическое движение. силовое отталкивание между пловцами.Здесь с параметрами подвижности м _⊥ =. Первый член уравнения (2) является уравнением Джеффри и описывает вращение частицы потоком жидкости с эллипсами с соотношением сторон 4. Последний член уравнения (2) описывает вращение пловца из-за крутящих моментов от стерических взаимодействий с соседями с . Чисто отталкивающие стерические силы и крутящие моменты между пловцами получаются с использованием метода, описанного Констанцо и др. [45]. Каждый пловец разделен на n _b = 4 бусинки, которые взаимодействуют с другими пловцами через мягкий потенциал Леннарда-Джонса [15].Этот потенциал допускает некоторые перекрытия, но не чрезмерно ограничивает временной шаг.

Для аппроксимации граничного условия при мы используем систему изображений. Для каждого пловца и в канале помещается зеркальный пловец с центром масс и ориентацией. Мы вычисляем активный тензор напряжения =, который возникает в результате передвижения как пловцов, так и их изображений. Безразмерная прочность стресслета устанавливается для стройного пловца-толкача с длиной и скоростью [44].Скорость жидкости получается путем решения с помощью ряда Фурье (безразмерных) двумерных уравнений Стокса с дополнительными активными напряжениями

во всей (реальной и зеркальной) области, которая считается бипериодической. Использование зеркальной области в направлении y для решения уравнения (3) является эффективным с вычислительной точки зрения способом аппроксимации эффектов интерфейса PDMS как граничного условия отсутствия напряжений (рисунок 2). Обратите внимание, что для обеспечения граничного условия прилипания для потока жидкости используются другие методы, например.г. [19] более подходят, но требуют большей вычислительной мощности для моделирования многих пловцов. Для простоты реализации мы также вычисляем стерические взаимодействия пловцов с их изображениями, что приводит к эффективному стерическому отталкиванию от стен.

Приблизить Уменьшить Сбросить размер изображения

Рис. 2. Примеры потока жидкости, создаваемого одним пловцом внутри канала (а) на границе и (б) в толще.

Загрузить рисунок:

Стандартный образ Изображение высокого разрешения

Обратите внимание, что мы не учитываем трение о поверхность, динамику жгутиков или потоки смазки на близком расстоянии между ячейками, а также какой-либо шум в движении отдельного пловца. Исходное состояние ячеек случайное и неупорядоченное.

Свободными параметрами при моделировании являются длина пловца, параметр его формы, его скорость плавания, напряжение стресса, определяющее величину генерируемых потоков жидкости, а также размеры канала.Мы отмечаем, что мы не сопоставляли их с экспериментальными значениями, поэтому сравнения между результатами являются качественными, а не количественными.

3.1. Локализация стабилизирует бактериальный поток

Мы вводим плотную суспензию плавучих B. subtilis в высокие беговые дорожки. Когда ограничение достаточно сильное, турбулентное коллективное движение стабилизируется и образует устойчивый поток (рисунок 1). Эта циркуляция стабильна в течение десятков минут, пока бактерии не перестанут плавать из-за недостатка кислорода.

Мы количественно оцениваем общее движение, измеряя нормализованный чистый поток:

где – бактериальный поток, измеренный с помощью PIV, единичного вектора вдоль основного направления канала (рисунок 1 (b)) и суммирования по всем подокнам PIV внутри канал и кадры 5-секундного фильма. Мы наблюдали циркуляцию CW и CCW с равной вероятностью и поэтому изучаем абсолютное значение Φ. указывает на чисто продольный поток (например) и указывает на глобально стационарную подвеску.

На рисунке 3 показана четкая зависимость чистого потока Φ от ширины канала w : в то время как суспензия демонстрирует сильную циркуляцию () для тонких камер, она быстро переходит в стационарное турбулентное состояние () вокруг.

Приблизить Уменьшить Сбросить размер изображения

Рис. 3. Нормализованный чистый поток Φ для каналов различной ширины как в экспериментах (кружки), так и в моделировании (крестики).Экспериментальные точки усредняются по крайней мере по пяти фильмам, записанным по крайней мере в два разных дня, симуляции усредняются по времени. безграничная квазидвумерная камера.

Загрузить рисунок:

Стандартный образ Изображение высокого разрешения

Мы сравнили эти результаты с моделированием в двумерной периодической области канала, чтобы имитировать прямой участок беговых дорожек (рисунок 1 (b)). Пловцы с эллипсоидом, подверженные как стерическим, так и гидродинамическим взаимодействиям, самоорганизуются в поток, аналогичный наблюдаемому экспериментальному движению, как показано на рисунке 5 (d).Мы вычислили чистый поток Φ, на этот раз суммируя только объемных пловцов. Такое же качественное поведение при сильной циркуляции мы обнаружили только для тонких каналов (где ℓ – длина пловца). На рисунке 3 показано, что переход от стабильного потока к общему стационарному состоянию может быть согласован между экспериментом и моделированием () путем выбора. Обратите внимание, что другие результаты, например сила текучести, не обязательно подбирается.

Приблизить Уменьшить Сбросить размер изображения

Рисунок 4. Схема бактериального потока и профили в зависимости от ширины каналов. (а) Бактериальная циркуляция, измеренная с помощью PIV для ширины каналов. (б) Усредненный профиль бактериального потока F ( y ) в экспериментах. Измерения (точки) соответствуют сумме (сплошная линия) двух функций бета-распределения и (пунктирные линии). (c) Усредненный профиль бактериального потока F ( y ) при моделировании. Расстояние выражается через длину пловца ℓ и поток жидкости через скорость плавания одной ячейки U ₀ .Эскизы пловцов по краям указывают их ориентацию (зеленая стрелка) и направление генерируемого потока жидкости (фиолетовая стрелка). (d) Расстояние y _м между интерфейсом PDMS и максимумом первой функции бета-распределения, как показано в (b) тонкой черной линией. Каждый балл представляет собой среднее значение не менее пяти фильмов, записанных не менее чем в два разных дня. Планки погрешностей: стандартная ошибка.

Загрузить рисунок:

Стандартный образ Изображение высокого разрешения

Приблизить Уменьшить Сбросить размер изображения

Рисунок 5. Снимки из моделирования микропловцов в канале 2D. (а, б) Разбавленные и плотные суспензии подвижных эллипсов без гидродинамических взаимодействий (). (c, d) Разбавленные и плотные суспензии с гидродинамическими взаимодействиями (). Коллективно генерируемые поля потока жидкости показаны наложенными (величина на графике (d) уменьшена вдвое). В обоих случаях поток жидкости не является чисто продольным, и можно различить волнообразный рисунок.

Загрузить рисунок:

Стандартный образ Изображение высокого разрешения

Приблизить Уменьшить Сбросить размер изображения

Рисунок 6. Флуоресцентно меченые бактерии указывают ориентацию и направление движения клеток на стенке PDMS и в массе. Мутант B. subtilis (штамм amyE :: hag (T204C) DS1919 3610 [43]) был помечен на теле и жгутиках соответственно FM 4-64 (ложно окрашен в красный и синий) и Alexa 488 малеимид (ложно окрашен в зеленый цвет). ).

Загрузить рисунок:

Стандартный образ Изображение высокого разрешения

3.2. Структура бактериального потока в ограниченном пространстве

В неограниченной среде плотные бактериальные суспензии демонстрируют типичные модели струй и завихрений [10–13].Интерфейсы PDMS на беговых дорожках изменяют эту схему, чтобы обеспечить чистую циркуляцию. Теперь исследуем стабилизацию картины через усредненный профиль потока в зависимости от ширины канала. Если бы поток управлялся градиентом давления, пассивная ньютоновская жидкость создавала бы параболический или насосный поток [46]. Тем не менее, бактерии в совокупности создают нерегулярный поток.

Мы измеряем профиль или поперечное сечение структур потока, усредненное по времени и пространству:

, где направление выбрано так, чтобы F ( y ) в среднем было положительным.На рисунке 4 (а) показано различное поведение в зависимости от ширины канала w .

Для самых тонких каналов () поток направлен параллельно длине канала, и F принимает квазипараболический профиль. F затем выравнивается и разделяется на две вершины для. При такой ширине начинают появляться небольшие завихрения, но они недостаточно сильны, чтобы изменить кровообращение. Когда ширина достигает критического значения, суспензия способна образовывать полные вихри. F принимает синусоидальную форму, так что бактерии с каждой стороны движутся в противоположных направлениях, а большинство вихрей циркулирует в одном и том же направлении (против часовой стрелки на рисунке 4 (а)).Для более широкой беговой дорожки () подвеска возвращается в квазитурбулентное состояние, и F демонстрирует несколько колебаний. В этом последнем случае, если мы усредняли за более длительный период времени, результирующий профиль должен прийти к нулю.

Для каналов шириной от 50 до 50, мы видим, что профиль F отображает два максимальных значения на расстоянии y _м от интерфейса PDMS (рисунок 4 (b)). Чтобы измерить эту длину для разной ширины, мы подбираем F с комбинацией двух симметричных функций бета-распределения:

, где A ₁ и A ₂ – амплитуда каждой функции и β – это параметр, задающий форму распределения.Каждая бета-функция симметрична другой, за исключением амплитуды:. Функции бета-распределения используются просто для простоты и не имеют физической связи с бактериальными суспензиями.

Мы обнаружили, что правильно описывает профили потока до (рис. 4 (а)). Для, две бета-функции почти идентичны и в основном перекрываются. Затем они разделяются, образуя функцию с двумя пиками (), которая затем становится антикоррелированной () для. Для самой большой ипподрома фиксируются только первые и последние пики, но не основные характеристики.

Затем мы измеряем расстояние y _м , на котором достигает своего максимума (представленного тонкой линией на рисунке 4 (b)). Рисунок 4 (d) показывает, что y _m не зависит от ширины беговой дорожки: профиль потока представляет собой просто сумму двух бета-функций, форма которых не зависит от ширины и которые расходятся по мере расширения каналов, предполагая, что кровообращение обеспечивается бактериями, расположенными у стены.

Моделирование демонстрирует аналогичное поведение с параболическим (), плоским (), двояким () и синусоидальным профилями (, рисунок 4 (b)).Единственное существенное различие заключается в движении бактерий на границе: моделирование показывает, что эти пловцы движутся против основной циркуляции:. Мы также экспериментально наблюдали, что бактерии на границах раздела плавают против основной циркуляции, но измерения PIV не смогли уловить эту особенность.

Как движение пловца на границе, так и подгонка профиля потока предполагают, что бактерии, расположенные близко к стене, играют важную роль в упорядочении суспензии.

3.3. Границы и поток жидкости управляют циркуляцией бактерий

Мы обращаемся к моделированию, чтобы понять, как границы влияют на организацию бактерий, и, в частности, чтобы найти причины общей циркуляции, наблюдаемые в экспериментах.Мы рассматриваем разные сценарии: разбавленные или плотные суспензии, с гидродинамическими взаимодействиями или без них. Примеры на рисунке 5 имеют ширину канала.

Сначала мы пренебрегаем гидродинамикой и рассматриваем пловцов, взаимодействующих между собой и с границей только через прямые стерические отталкивания. Как в разбавленном, так и в плотном случаях (рисунки 5 (a), (b)) пловцы собираются на границе, образуя стаи или скопления, похожие на ежей, как наблюдалось ранее [45, 47]. Из-за своей вытянутой формы пловцы на границе демонстрируют локальное нематическое выравнивание, когда головы обращены к границе раздела, и медленно движутся вдоль нее.Клетки в основной массе скапливаются скоплениями с малозаметной организацией.

Далее мы включаем потоки жидкости, создаваемые бактериями. В разбавленных суспензиях, как показано на рисунке 5 (c), пловцы собираются на границе и образуют уплотненные слои, аналогичные стерическому случаю. Однако они создают сильный поток жидкости против направления плавания. Если ширина канала достаточно мала, жидкость переориентирует противоположный слой, так что пловцы на каждой стороне канала движутся в одном направлении.Эта упаковка и организация не наблюдаются экспериментально при низких плотностях, скорее всего, потому, что 2D-моделирование не допускает перекрытия, тогда как бактерии на глубоких ипподромах могут легко плавать и перекатываться друг с другом.

При дальнейшем увеличении плотности (рисунок 5 (d)) действует тот же механизм: два граничных слоя пловцов управляют сильным потоком жидкости, переориентируя и адвектируя ячейки, которые теперь заполняют центр канал. Пловцы, занимающиеся массовым плаванием, имеют предвзятую ориентацию против этого потока, но не плавают достаточно быстро, чтобы преодолеть адвекцию.Таким образом, они переносятся к пограничным слоям, вызывая макроскопическую объемную циркуляцию, аналогичную экспериментальным наблюдениям (рисунок 1 (b)).

Моделирование также проясняет формы профиля (рис. 4). Эскизы пловцов, нарисованные у стенок канала на рис. 4 (c), показывают их ориентацию в плавании и направление потока жидкости, который они отталкивают. Этот поток адвектирует на определенном расстоянии клетки в объеме, общее коллективное движение которых можно описать двойными профилями бета-функции.

Экспериментально бактерии могут проходить через s ^-1 , что значительно быстрее, чем скорость плавания одиночных клеток, равная s ^-1 . Такая высокая скорость предполагает, что в основном движении бактерий действительно доминирует адвекция жидкости.

Чтобы проверить организацию, предсказанную моделированием, мы отслеживаем флуоресцентно меченые бактерии (рис. 6). Мы вывели ориентацию клеток из относительного положения тела и жгутиков, а общее движение – из смещения тела.Мы обнаружили такую ​​же смещенную ориентацию против потока в объеме тонких каналов (m): из 24 отслеживаемых помеченных бактерий 4 были ориентированы вдоль направления, 4 плыли по течению и 16 плыли против течения (ориентировались против течения). их общее направление движения). Клетки на поверхности имели поступательное движение против основной циркуляции, что подтверждает организацию, обнаруженную при моделировании.

3.4. Пространственные и временные изменения в паттернах бактериального потока

Наша текущая модель – краевые бактерии, управляющие основным потоком посредством гидродинамических взаимодействий, – объясняет общую циркуляцию.Как описано ранее, бактерии на тонких беговых дорожках также образуют частичные движущиеся вихри, напоминающие неограниченное турбулентное состояние. Мы изучаем эту картину потока, вычисляя как длины корреляции, так и движение завихрений.

Сначала мы вычисляем пространственную корреляцию, из которой извлекаем две характерные длины: период колебаний L _c и длину спада амплитуды L _e . Для этого мы воспользуемся преимуществом бокового ограничения и модифицируем классическую двухточечную корреляционную функцию скорости, чтобы сосредоточиться на изменении ортогонального потока u _y по длине канала:

где и взяв сумму над подокнами PIV в основной части канала полного 5-секундного фильма. C демонстрирует затухающие колебания (рисунок 7 (b)), поведение, которое наблюдалось в предыдущей работе [48], но, насколько нам известно, не было полностью проанализировано.

Приблизить Уменьшить Сбросить размер изображения

Рис. 7. Корреляция бактериального потока в зависимости от ширины канала w . (a) Измерение корреляционных длин в зависимости от ширины беговой дорожки w . И период колебаний, и масштаб длины спада амплитуды выходят на плато на большой ширине (пунктирные линии).Баллы рассчитываются как минимум по пяти фильмам, снятым как минимум в два разных дня. Планки погрешностей: стандартная ошибка. безграничные квазидвумерные камеры. (b) Пример корреляционной функции C ( s ), экспериментально измеренной и установленной.

Загрузить рисунок:

Стандартный образ Изображение высокого разрешения

Для вычисления длины корреляции использовались два основных подхода: либо аппроксимация убывающей экспоненты [11, 13], либо определение расстояния, на котором C достигает нуля или своего первого минимума [47].Вместо этого мы подбираем C с функцией, которая описывает как затухание, так и колебания:

, где первый член указывает на уменьшение амплитуды по длине L _e , а косинусный член выделяет период колебаний L _c (размер завихрения).

На рис. 7 (a) показано, что L _e и L _c увеличиваются с шириной беговой дорожки и достигают плато вокруг.Этот размер сравним с тем, когда поток прекращается и суспензия способна образовывать полные вихри. Более того, значения на плато и, сопоставимы на больших беговых дорожках и в неограниченных 2D камерах (отмечены на графиках).

Хотя мы также наблюдаем волновую картину при моделировании, корреляционная функция в основном отражает периодичность домена.

Таким образом, паттерны бактериального потока не статичны: пока бактерии текут в канале, частичные завихрения, которые они создают, также перемещаются.Чтобы количественно оценить этот эффект, мы измеряем движение структуры потока по пространственной корреляции между двумя временными точками:

, взяв сумму по всем подокнам PIV внутри канала и за полный 5-секундный фильм. принимает максимальное значение с ^* , что дает скорость волны:. Мы сравниваем эту скорость со средней скоростью циркуляции и обнаруживаем, что волна распространяется немного быстрее, чем бактерии: медиана (стандартная ошибка: 0,1). Тем не менее, более подробный анализ необходим, чтобы полностью понять динамику между движением клеток и распространением волн в этом конкретном ограничении.

Мы показали, что заключение плотной бактериальной суспензии в тонкий периодический беговой дорожка приводит к самопроизвольному формированию устойчивой циркуляции вдоль нее. Подобная установка ранее использовалась для изучения двух различных систем активного вещества: марширующей саранчи [49] и катящихся коллоидных частиц [27]. Что касается бактерий, коллективное движение коллоидов обусловлено гидродинамическими взаимодействиями, но может привести к образованию бегущих волн и скачков плотности, в то время как бактериальная суспензия всегда кажется пространственно однородной.

Чтобы понять, как подвеска самоорганизуется на гоночных трассах, мы измерили чистый поток, корреляцию потоков и профиль в зависимости от ширины канала. Мы воспроизвели эти результаты с помощью моделирования, выявив потоки жидкости, создаваемые бактериями. Комбинируя эти различные подходы, мы нарисуем на рисунке 8 картину того, как движение бактерий, гидродинамические взаимодействия и удержание влияют на макроскопическую циркуляцию.

Приблизить Уменьшить Сбросить размер изображения

Рисунок 8. Иллюстрация бактериальной организации на беговых дорожках различной ширины.

Загрузить рисунок:

Стандартный образ Изображение высокого разрешения

Независимо от размера канала, бактерии на поверхности PDMS перемещаются в заданном направлении, выталкивая жидкость в противоположном направлении на расстояние. Этот поток жидкости, намного быстрее, чем скорость плавания отдельной клетки, переориентирует и адвитирует клетки в суспензии. В результате основная масса бактерий переносится против их плавательной ориентации в обратном направлении.Затем возникает различное поведение при различной ширине канала. Для тонких каналов (m) поток жидкости с одной стороны достигает противоположной границы раздела и переориентирует бактерии так, что все клетки на разных поверхностях движутся в направлении, противоположном основной циркуляции, и вызывают параболические, плоские и двояковыпуклые профили (рисунок 4). Внутри канала ограничение ограничивает турбулентное движение бактерий, так что бактерии образуют частичные завихрения, которые в основном перемещаются с потоком бактерий, не влияя на общую циркуляцию.Для каналов промежуточной ширины () суспензия образует полные вихри, не показывая чистой циркуляции (). Тем не менее, координация между противоположными сторонами не потеряна, но теперь кажется антикоррелированной (как показано на профилях синусоидального потока, рис. 4). В частности, вихри в каналах имеют предпочтительное направление вращения, либо по часовой стрелке, либо против часовой стрелки, в зависимости от ориентации бактерий на границе раздела. Для каналов еще большего размера, суспензия восстанавливает свое неограниченное турбулентное состояние, и никакой корреляции между противоположными стенками PDMS не наблюдается.Однако до сих пор остается неясным, как выбирается критический масштаб вихревых макроскопических структур в коллективном движении этой бактерии.

Некоторые модели континуума активного вещества в ограниченном пространстве ранее предсказывали однонаправленный поток или чистую циркуляцию [21-25]. Равник и др. [24] обнаружили, что бактериальный поток в трубе имеет слабую () составляющую в направлениях y и z , но с характером вихрей, совершенно отличным от волнообразного потока, который мы наблюдаем здесь.Филдинг и др. [22] рассматривали двумерные каналы различной ширины, но наблюдали циркуляцию для каналов, ширина которых превышает размер вихря суспензии, что противоречит нашим измерениям чистого потока (рис. 3). Ниф и Круз [25] рассматривают активные полярные жидкости в кольцевых доменах и видят удивительно похожие модели, такие как однонаправленное течение, движущиеся или стационарные вихри для увеличения ширины канала в случае растяжимых частиц. Многие различия между этими теоретическими предсказаниями могут возникать из-за сложности задания реалистичных граничных условий и включения в такие модели континуума как потока жидкости, создаваемого пловцом, так и движения бактерий.

Несмотря на многие предыдущие исследования моделирования микропловцов в каналах или между пластинами, это специфическое коллективное поведение, о котором мы здесь сообщаем, ранее не наблюдалось в экспериментах или моделированиях. Menzel [50] выполнил моделирование самодвижущихся частиц, используя модель Vicsek с выравнивающими взаимодействиями, без гидродинамики, и наблюдал коллективную миграцию вдоль канала в виде скоплений частиц и полос. Костанцо и др. [45] моделировали удлиненных пловцов в периодическом канале, взаимодействующих напрямую и через диполярные потоки жидкости, но не наблюдали какого-либо коллективного поведения и чистой циркуляции, когда внешний поток не был наложен.Одно из возможных объяснений состоит в том, что они вычисляли гидродинамические взаимодействия без учета границ. Здесь мы включаем зеркальные изображения, чтобы приблизиться к интерфейсу PDMS, который улучшает объемный поток жидкости. Эти небольшие различия между этими исследованиями подчеркивают ключевую роль, которую играют не только поверхности и возникающие из них потоки, управляемые ячейками, но также и формы вытянутых частиц, которые необходимы для того, чтобы пловцы ориентировались и располагались рядом друг с другом у стены.

Тем не менее, поведение бактерий на беговых дорожках напоминает некоторые предыдущие эксперименты и может быть понято как комбинация выводов, полученных из них.Плавающие бактерии, приклеенные к поверхности, могут координировать свою ориентацию и создавать чистый поток вдали от стены. Дарнтон и др. [51] использовали этот эффект для перемещения небольших объектов, в то время как Ким и др. [37] использовали его, чтобы превратить микрожидкостный канал в насос с питанием от бактерий. Это явление качественно похоже на то, что мы наблюдали на беговых дорожках, за исключением того, что здесь бактерии свободны и плавают по поверхности, создавая поток жидкости в объеме. Другие исследования показали, что на движение пловцов в микроканалах влияет внешний сдвигающий поток [34, 38–41].В частности, пловцы склонны плыть против течения, что мы также наблюдали при моделировании и подтверждали флуоресцентной маркировкой. Наконец, самоорганизация в беговых дорожках сравнима с тем, что наблюдалось, когда бактерии были заключены в сплюснутые капли: бактерии на границе раздела движутся в направлении, противоположном основной массе, которая сама переносится жидкостью [14, 15]. В обоих экспериментах (капли и беговые дорожки) мы обнаружили, что круговая циркуляция нарушается, типичный размер завихрений в неограниченных камерах [36], а также критический диаметр круговых капель, ниже которого движение бактерий стабилизируется в один вихрь [14].

Микрожидкостные каналы использовались ранее для изучения поведения микропловцов, в частности, для сортировки бактерий E. coli по длине [52] или прямого выделения сперматозоидов [53, 54] с помощью трещоточных каналов. Изгибы микроканалов в этих случаях предназначены для того, чтобы направлять пловцов в одном заданном направлении. Здесь мы использовали прямые стенки, так что самопроизвольно возникающий поток с равной вероятностью может возникать в любом направлении. В качестве расширения нашей работы можно было бы спроектировать круглый канал с храповыми поверхностями, чтобы направлять поток суспензии в выбранном левом или правом направлении.

Плотные бактериальные суспензии были тщательно изучены без ограничений, но их самоорганизация представляет новые проблемы и сюрпризы. Представленные здесь эксперименты не только дают представление об эффекте удержания, но и помогают понять общее поведение таких подвесок. В частности, мы показали, что корреляционная функция может быть проанализирована как две части: осциллирующий и убывающий член. Насколько нам известно, в других исследованиях описан только один из двух, соответствующий размеру вихря или длине устойчивости.Здесь ограничение на беговую дорожку стабилизирует подвеску, чтобы сформировать более регулярный узор, подчеркивая эту структуру. Благодаря дополнительному пониманию нашей работы некоторые предыдущие результаты могут быть переинтерпретированы: например, Gachelin et ​​al [13] показали, что длина персистентности суспензии E. coli увеличивается с увеличением плотности, что приводит к более медленному увеличению распад корреляционной функции C ( s ) при более высоких плотностях. Однако первый ноль C ( s ) произошел во всех их измерениях с постоянным значением, что указывает на то, что размер завихрения не зависит от концентрации, а является внутренней шкалой длины, связанной с плавающими бактериями.

Наконец, эта установка ограничения открывает новые возможности для изучения коллективного поведения в более сложных естественных или искусственных средах, которые могут включать сети каналов, различные твердые или жидкие поверхности раздела и химические аттрактанты. Примечательно, что Wilking et ​​al показали, что биопленок B. subtilis образуют каналы, в среднем диаметром [4], сравнимыми с нашей критической шириной.