Бпв 2: Блок с предохранителем-выключателем (ЭТ) БПВ-2 У сПН-2 250А (ET520937)

alexxlab | 01.10.1973 | 0 | Разное

Содержание

Блок с предохранителем-выключателем (ЭТ) БПВ-2 У сПН-2 250А (ET520937)

Код товара 6177579

Артикул ET520937

Страна Россия

Наименование  

Упаковки 16 шт

Сертификат RU C-RU.АЛ16.B09558

Тип изделия Блок предохранитель-выключатель

Номинальный ток,А 400

Напряжение, В 380

Степень защиты IP00

Вид рукоятки Поворотная

Исполнение рукоятки Несъемная

Способ монтажа Монтажная плата

Количество НО контактов 2

Количество НЗ контактов 2

Высота, мм 350

Длина, мм 315

Ширина, мм 240

Диапазон рабочих температур от -40 до +40

Количество полюсов, шт 3

Тип подключения Болтовое

Климатическое исполнение У3

Масса, кг 11.3

Нормативный документ ГОСТ Р 51321.1-2007

Частота, Гц 50

Все характеристики

Характеристики

Код товара 6177579

Артикул ET520937

Страна Россия

Наименование  

Упаковки 16 шт

Сертификат RU C-RU.АЛ16.B09558

Тип изделия Блок предохранитель-выключатель

Номинальный ток,А 400

Напряжение, В 380

Степень защиты IP00

Вид рукоятки Поворотная

Исполнение рукоятки Несъемная

Способ монтажа Монтажная плата

Количество НО контактов 2

Количество НЗ контактов 2

Высота, мм 350

Длина, мм 315

Ширина, мм 240

Диапазон рабочих температур от -40 до +40

Количество полюсов, шт 3

Тип подключения Болтовое

Климатическое исполнение У3

Масса, кг 11.3

Нормативный документ ГОСТ Р 51321.1-2007

Частота, Гц 50

Все характеристики

Всегда поможем:
Центр поддержки
и продаж

Скидки до 10% +
баллы до 10%

Доставка по городу
от 150 р.

Получение в 150
пунктах выдачи

Электрофидер | Блок предохранитель-выключатель БПВ-2

Блоки предохранитель-выключатель БПВ предназначены для нечастых оперативных коммутаций, а так же для защиты электрических сетей и приемников от недопустимых длительных перегрузок и токов короткого замыкания.

Блоки применяются в электрических установках как переменного так и постоянного тока.

ОСНОВНЫЕ ТЕХНИЧЕСКИЕ ДАННЫЕ

Блоки соответствуют требованиям технических условий ТУ 16-522.123-76, ГОСТ Р51321.1-2000 и комплекту технической документации.

Номинальные токи предохранителей, плавких вставок и напряжение приведены в таблице 1.

  

Исполнение блока

Обознач. констр.док.

Номин.

ток

А

Номин.

напряж.

В

Номинальный ток плавких

вставок, А

БПВ-1УЗ

А95

100

-380 -220

32,40,50,63,80,100

БПВ-2УЗ

А96

250

100, 125, 160,250

БПВ-4УЗ

А97

400

250,300,350,400

Степень защиты блоков - ГР00, со стороны управляющегоэлемента - ГР41.

Блоки комплектуются предохранителями типа ГШ2.

Номинальное значение климатических факторов по ГОСТ15543 и ГОСТ15150. При этом высота над уровнем моря не более 2000м.

Окружающая среда невзрывоопасная, не содержащая газов, жидкостей и пыли в концентрациях, нарушающих работу блоков.

Блоки обеспечивают 2500 циклов включений-отключений с зачисткой и смазкой контактов плавкой вставки через каждые 1000 циклов.


По вопросам оптового приобретения данного товара обращайтесь в коммерческий отдел ООО «Электрофидер» тел:  (84595) 2-82-44.

Не является публичной офертой. Указанные цены могут меняться в случае изменения заводских цен, таможенных платежей и других, не зависящих от компании ООО «Электрофидер» условий.

Блок предохранитель-выключатель БПВ-2 250А с ПН-2

Упростите Вашу работу с заявкой

Скорее всего, перед вами сейчас лежит смета или список позиций, которые необходимо приобрести.

Отправьте нам на E-mail заявку целиком, и мы выставим Вам счет на то, что Вам нужно. Мы обсчитываем каждую заявку индивидуально и стараемся предоставить лучшую цену, исходя из вашего объема и требований по срокам поставки. На сайте представлена лишь часть ассортимента, который мы можем поставить. Полный ассортимент значительно шире.

Убедитесь, что в письме с заявкой есть Ваше имя, телефон, реквизиты (или хотя бы название) компании, на которую нужно выставить счет. Электронную почту вы можете увидеть, нажав на кнопку «Показать E-mail» в правом верхнем углу сайта.

Блок предохранитель-выключатель БПВ-2 250А с ПН-2 можно купить у нас по безналичному расчету, отправив заявку на электронную почту. Мы осуществляем доставку по Москве до адреса клиента, либо до транспортной компании, которая осуществит доставку в Ваш регион. Доставка может быть как бесплатной, так и платной в зависимости от суммы закупки и дальности. Точный просчет может совершить менеджер по вашему запросу.

Характеристики

Номинальный ток250 А
СерияБПВ
Степень защитыIP 41
ИсполнениеРубильник
ПроизводительНортХаус ООО
КорпусОткрытый
РукояткаБоковая с выносом на перед.панель
Индивидуальная упаковка
Количество в упаковке(шт) 1
Габариты(мм) 240 x 350 x 350
Вес(кг) 12.7
Блоки предохранитель-выключатель БПВ предназначены для неавтоматической коммутации силовых электрических цепей с номинальным напряжением до 380 В переменного тока частотой 50 Гц в устройствах распределения электрической энергии, в том числе в комплектных устройствах (шкафах, ящиках и т.п.). Блоки предназначены также для защиты электрических цепей при токах перегрузки и токах КЗ.

Обозначение модели:БПВ- Х1

Б - блок
П - предохранитель
В - выключатель

Х1 - номинальный ток (1-100 А; 2-250 А; 4-400 А)

БПВ-2 У3 с ПН-2 250А, блок с предохранителем-выключателем (ЭТ)

БПВ-2 У3 с ПН-2 250А, блок с предохранителем-выключателем (ЭТ)

Контроль качества в нашей компании происходит в течение всего процесса производства. Продукция проходит проверку в испытательных лабораториях. Вся продукция сертифицирована в соответствии с требованиями «Технического регламента Таможенного Союза 004/2011 «О безопасности низковольтного оборудования» (ЕАС). Предоставляется гарантия на каждое изделия и производится гарантийное обслуживание.

Оформите заказ на сайте компании Электро ОМ на Кросс-модули от ПО Электротехник . Наши менеджеры помогут рассчитать нужное количество, уточнят наличие на складе и срок поставки, расскажут об особенностях работы с продуктом, помогут подобрать вспомогательные инструменты.

БПВ-2 У3 с ПН-2 250А, блок с предохранителем-выключателем (ЭТ) арт: ET520937 купить с доставкой в интернет - магазине Электро ОМ


Характеристики

Габаритные размеры LxHxB, мм

Климатическое исполнение и категория размещения

Наименование изделия

блок предохранитель-выключатель БПВ

Номинальное рабочее напряжение, Ue

Номинальный рабочий ток, In

Степень защиты

Тип предохранителя

Условия использования

в закрытых помещениях

Число полюсов

Нет отзывов о данном товаре.

Написать отзыв

Ваш отзыв:

Примечание: HTML разметка не поддерживается! Используйте обычный текст.

Отправить отзыв

Заказать товар:

Через форму заказа на сайте

По телефонам:

Отправить на заявку на электронную почту:

Мы осуществляем отправку по РФ - СДЭК, Деловые линии, КИТ, Собственным транспортом (2 и 5 тн) 

Бесплатная доставка по Екатеринбургу при сумме от 3000 руб - карта в разделе оплата и доставка

190322010210 Накладка тормозной колодки BPW 420х180 2-й ремонт (19032) комплект на ось LUMAG - 190322010210 19032

190322010210 Накладка тормозной колодки BPW 420х180 2-й ремонт (19032) комплект на ось LUMAG - 190322010210 19032 - фото, цена, описание, применимость. Купить в интернет-магазине AvtoAll.Ru Распечатать

3

1

Применяется: ТОНАР

Артикул: 190322010210еще, артикулы доп.: 19032скрыть

Код для заказа: 288679

Есть в наличии Доступно для заказа - 3 шт.Сейчас в 1 магазине - 3 шт.Цены в магазинах могут отличатьсяДанные обновлены: 21.08.2021 в 04:30 Доставка на таксиДоставка курьером - 150 ₽

Сможем доставить: Завтра (к 22 Августа)

Пункты самовывоза СДЭК Пункты самовывоза Boxberry Постаматы PickPoint Магазины-салоны Евросеть и Связной Отделения Почты РФ Самовывоз со склада интернет-магазина на Кетчерской - бесплатно

Возможен: сегодня c 10:00

Самовывоз со склада интернет-магазина в Люберцах (Красная Горка) - бесплатно

Возможен: сегодня c 19:00

Самовывоз со склада интернет-магазина в поселке Октябрьский - бесплатно

Возможен: сегодня c 19:00

Самовывоз со склада интернет-магазина в Сабурово - бесплатно

Возможен: сегодня c 19:00

Самовывоз со склада интернет-магазина на Братиславской - бесплатно

Возможен: сегодня c 19:00

Самовывоз со склада интернет-магазина в Перово - бесплатно

Возможен: сегодня c 19:00

Самовывоз со склада интернет-магазина в Кожухово - бесплатно

Возможен: завтра c 12:00

Самовывоз со склада интернет-магазина в Вешняков - бесплатно

Возможен: завтра c 12:00

Самовывоз со склада интернет-магазина из МКАД 6км (внутр) - бесплатно

Возможен: завтра c 12:00

Самовывоз со склада интернет-магазина в Подольске - бесплатно

Возможен: завтра c 12:00

Код для заказа 288679 Артикулы 190322010210, 19032 Производитель LUMAG Каталожная группа: ..Тормоза
Механизмы управления
Ширина, м: 0.18 Высота, м: 0.21 Длина, м: 0.18 Вес, кг: 9.92

Отзывы о товаре

Где применяется

Обзоры

Наличие товара на складах и в магазинах, а также цена товара указана на 21.08.2021 04:30.

Цены и наличие товара во всех магазинах и складах обновляются 1 раз в час. При достаточном количестве товара в нужном вам магазине вы можете купить его без предзаказа.

Интернет-цена - действительна при заказе на сайте или через оператора call-центра по телефону 8-800-600-69-66. При условии достаточного количества товара в момент заказа.

Цена в магазинах - розничная цена товара в торговых залах магазинов без предварительного заказа.

Срок перемещения товара с удаленного склада на склад интернет-магазина.

Представленные данные о запчастях на этой странице несут исключительно информационный характер.

7198275a2be3a65357365b9dc3546467

Добавление в корзину

Код для заказа:

Доступно для заказа:

Кратность для заказа:

Добавить

Отменить

Товар успешно добавлен в корзину

!

В вашей корзине на сумму

Закрыть

Оформить заказ

Бензопривод ТСС БПВ-2,7 к глубинному вибратору 018110, купите недорого

Бензопривод ТСС БПВ-2,7 к глубинному вибратору. Используется при отсутствии электроснабжения на строительных площадках, для уплотнения бетонных смесей. Конструкция позволяет бензоприводу вращаться вокруг своей оси, что значительно облегчает работу оператора при виброуплотнении бетона. Может использоваться с глубинными валами других производителей, при условии соответствующего типа подсоединения вала к приводу.

Производитель

ТСС

Вид топлива

бензин АИ-92

Частота вращения, об/мин

3000-3600

Габариты упаковки

520x380x520 мм

Тип соединения

ДУ рапид (EURO)

Тип двигателя

Бензиновый. 4-х тактный. воздушного охлаждения

Объём бака

3.8 л

Расход топлива

1.2 л/ч

Габариты, мм

520x380x520

Модель двигателя

S20. Аналог Robin EY20-3D

Для продажи в составе ДГУ

нет

Артикул производителя

018110

Блок предохранитель выключатель бпв 2

Блоки предохранитель-выключатель БПВ предназначены для нечастых оперативных коммутаций, а так же для защиты электрических сетей и приемников от недопустимых длительных перегрузок и токов короткого замыкания.

Блоки применяются в электрических установках как переменного так и постоянного тока.

ОСНОВНЫЕ ТЕХНИЧЕСКИЕ ДАННЫЕ

Блоки соответствуют требованиям технических условий ТУ 16-522.123-76, ГОСТ Р51321.1-2000 и комплекту технической документации.

Номинальные токи предохранителей, плавких вставок и напряжение приведены в таблице 1.

Номинальный ток плавких

Степень защиты блоков — ГР00, со стороны управляющегоэлемента — ГР41.

Блоки комплектуются предохранителями типа ГШ2.

Номинальное значение климатических факторов по ГОСТ15543 и ГОСТ15150. При этом высота над уровнем моря не более 2000м.

Окружающая среда невзрывоопасная, не содержащая газов, жидкостей и пыли в концентрациях, нарушающих работу блоков.

Блоки обеспечивают 2500 циклов включений-отключений с зачисткой и смазкой контактов плавкой вставки через каждые 1000 циклов.

По вопросам оптового приобретения данного товара обращайтесь в коммерческий отдел ООО «Электрофидер» тел: (84595) 2-84-76.

Не является публичной офертой. Указанные цены могут меняться в случае изменения заводских цен, таможенных платежей и других, не зависящих от компании ООО «Электрофидер» условий.

Блок «предохранитель — выключатель» (БПВ-2 250А) (fuse-switch): Выключатель, у которого плавкая вставка или держатель с плавкой вставкой образуют подвижный контакт.

НАЗНАЧЕНИЕ
БПВ-2 предназначен для нечастых включений и отключений, а также для защиты электрических сетей и приемников от недопустимых длительных перегрузок и токов короткого замыкания. Ящики применяются в электрических установках как переменного, так и постоянного тока.
КОНСТРУКЦИЯ
. Имеется возможность блокировки дверки.
ТЕХНИЧЕСКИЕ ДАННЫЕ
Номинальный ток предохранителей: 80, 100, 125, 160, 200, 250 А
КОМПЛЕКТАЦИЯ
Комплектуется предохранителями серии ПН-2. 3шт.

Обозначение модели: БПВ- Х1

Б — блок
П — предохранитель
В — выключатель
Х1 — номинальный ток (1-100 А; 2-250 А; 4-400 А)

Внимание: характеристики товара, комплект поставки и внешний вид могут быть изменены производителем без предварительного уведомления. Указанная информация не является публичной офертой.

Масса, кг, не более

1. Предназначены для нечастых включений и отключений силовых электрических цепей без нагрузки напряжением до 1000 В переменного тока частотой 50 Гц и для защиты цепей от токов перегрузки и токов короткого замыкания.

Блоки устанавливаются в устройствах распределения электрической энергии, в том числе в низковольтных комплектных устройствах (щитах, сборках, шкафах и т. п.)

2. Технические характеристики:

— основные параметры блоков приведены в таблице

«>

Бычий папилломавирус типа 2 - обзор

Животные модели и терапевтические вакцины

Из-за большого разнообразия папилломавирусов (ПВ), заражающих различных животных, множество животных можно использовать в качестве экспериментальных моделей инфекции ВПЧ. Хотя они не могут быть инфицированы ЛВ человека, поскольку вирусы папилломы являются видоспецифичными, некоторые из этих ЛВ животных имеют общие характеристики с инфекциями и заболеваниями ВПЧ, например тканевую специфичность для кожи или слизистой оболочки и в некоторых случаях развитие злокачественных новообразований (Brandsma, 1994).

Две наиболее изученные модели - это вирусы папилломы, заражающие кроликов с хвостом (CRPV), и вирусы крупного рогатого скота (BPV-1, 2 и 4). CRPV был первым PV, идентифицированным Shope в 1933 году, и вскоре после этого была обнаружена связь между инфекцией PV и карциномой (Rous and Beard, 1935). После наблюдения спонтанного регресса бородавок было показано, что терапевтическая вакцинация с использованием аутологичных или гетерологичных бородавок увеличивает частоту регресса (Evans et al., 1962). Более свежие данные продемонстрировали, что вакцинация очищенными слитыми белками E1 и E2 Trip E индуцировала регрессию повреждений, вызванных папилломавирусом (Selvakumar et al., 1995a), но эта эффективность не была улучшена адъювантацией с адъювантом индуктора Th2 Ribi. В CRPV также было показано, что вакцинация белком E6, но не белком E7, вызывала регресс бородавок. Регрессия опухоли связана со специфическими антителами и лимфопролиферативными ответами на E2 в модели кролика с хвостом (Selvakumar, 1995b).

Инфекции, вызванные вирусом папилломы крупного рогатого скота (BPV), отличаются от HPV тем, что имеют место поражение кожи и отсутствие опухолевого прогрессирования (Campo, 1994). С другой стороны, некоторые BPV (BPV-1 и 2) вызывают кожные поражения, а другие влияют на участки слизистой оболочки, такие как BPV-4. В этой модели крупного рогатого скота регресс поражений, вызванных BPV-4, был индуцирован белком E7 (Campo et al., 1993), а не E2. Кроме того, вакцинация L2 не предотвратила развитие поражений, но это действительно вызвало раннюю регрессию опухоли.Следовательно, L2 можно рассматривать в качестве действительного кандидата на терапевтический антиген (Brandsma, 1996; Kirnbauer et al., 1996). Точно так же при инфекции BPV-2 L2, введенный перед заражением, не защищает от развития повреждений, но эти бородавки сильно инфильтрируются Т-клетками и быстро регрессируют (Campo et al., 1994).

В обеих моделях животных структурный белок L1 не способен вызывать регресс, но может продуцировать большие количества нейтрализующих антител, которые защищают от заражения (Jarret et al., 1991; Christensen et al., 1996; Kirnbauer et al., 1996).

Две другие представляющие интерес модели животных были изучены менее интенсивно. Вирус папилломы ротовой полости собак (COPV) вызывает развитие буккальных, язычных и десневых папиллом, но не вызывает злокачественного прогрессирования. COPV использовался в качестве модели для профилактики бородавок слизистой оболочки полости рта у собак (Suzich et al., 1995). Вирус папилломы макак-резус (Rh PV1) может быть отличной моделью для оценки канцерогенеза шейки матки, ассоциированного с ВПЧ, но получить инфекционный вирус сложно.

Модель опухоли, вызванной ВПЧ, у мышей была недавно разработана и в настоящее время широко используется для тестирования профилактических и терапевтических вакцин (Feltkamp et al., 1993; Lin et al., 1996; Greenstone et al. , 1998; De Bruijn et al., 1999).

В заключение, регресс поражений, вызванных папилломавирусом, может быть получен по крайней мере на двух различных моделях животных. Этот регресс сопровождается сильным гуморальным и клеточным иммунным ответом.

Рекомбинантный белок Е3 (а.о. 1-95) BPV-2

Вирус папилломы крупного рогатого скота типа 2 Вероятный белок E7, рекомбинантный белок.

Источник

E. coli или дрожжи, бакуловирусы или клетки млекопитающих.

Приложения

Используется для ELISA и других иммуноанализов.

Состав

Буфер на основе Триса, 50% глицерина.

Чистота

> 85% чистоты по данным SDS-PAGE.

Склад

Хранить при -20 ° C кратковременно, от -20 ° C до -80 ° C длительно.

Введение

Папилломавирусы (ПВ) представляют собой канцерогенные ДНК-вирусы, способные инфицировать эпителиальные клетки кожи и слизистых оболочек.Хозяин вирусов включает в себя множество животных, и человек также является одним из них. Попадая в организм хозяина через разрез, вирус может вызывать папилломы или бородавки, но обычно не вызывает серьезных клинических симптомов. В некоторых случаях такие саркомы перерастают в злокачественные опухоли. Существует не менее 300 типов ПВ и обнаружено не менее 200 типов вируса папилломы человека (ВПЧ). Все ПВ имеют схожую геномную структуру. Геном вируса представляет собой двухцепочечную кольцевую ДНК размером около 8 т.п.н., которую можно разделить на область E, кодирующую ранний белок E1-E7, область L, кодирующую поздние структурные белки L1 и L2, и некодирующую область. область.

Альтернативные названия

БПВ; Папилломавирус; Папилломавирусы

Все наши продукты могут использоваться только в исследовательских целях. Эти ингредиенты вакцины НЕЛЬЗЯ использовать непосредственно на людях или животных.


Онлайн-запрос

Все наши продукты могут использоваться только в исследовательских целях.Эти ингредиенты вакцины НЕЛЬЗЯ использовать непосредственно на людях или животных.

Обнаружение коинфекции необычных типов методом ПЦР-ПДРФ

Вирус папилломы крупного рогатого скота (BPV) признан возбудителем доброкачественных и злокачественных опухолей крупного рогатого скота. В настоящее время охарактеризовано тринадцать типов ДПЖ, которые классифицируются на три различных рода, связанных с различными патологическими исходами.Описанные типы BPV, а также другие предполагаемые типы были продемонстрированы методами молекулярной биологии, в основном с использованием вырожденных праймеров ПЦР. В частности, расхождения в нуклеотидной последовательности гена L1 полезны для идентификации и классификации новых типов папилломавирусов. В настоящей работе метод, основанный на методе ПЦР-ПДРФ и секвенировании ДНК, был оценен как инструмент скрининга, позволяющий обнаруживать два относительно редких типа ДПЖ в образцах поражений у шестилетней молочной коровы голштинской породы, хронически поражены кожным папилломатозом.Эти данные указывают на распространение BPV с неясным патогенным потенциалом, поскольку два относительно редких, новых описанных типа BPV, которые впервые были охарактеризованы в Японии, были также обнаружены в Бразилии.

1. Введение

Вирус папилломы крупного рогатого скота (BPV) признан возбудителем доброкачественных и злокачественных опухолей крупного рогатого скота, таких как папилломы кожи, доброкачественные фиброплазии, рак мочевого пузыря и пищевода, что приводит к значительным экономическим потерям. Этот онкогенный вирус имеет геном двухцепочечной кольцевой ДНК размером примерно восемь килобаз [1].

В настоящее время семейство Papillomaviridae разделено на 16 родов в соответствии с их геномной организацией [2, 3]. Геном папилломавируса (PV) кодифицировал функциональные, ранние (E) белки и структурные, поздние (L) белки, экспрессируемые на разных стадиях вирусного цикла. L1 является наиболее консервативным геном в геноме PV и поэтому использовался для идентификации новых PV: один изолят PV распознается как новый тип, если был клонирован полный геном и последовательность ДНК L1 отличается более чем на 10 % от ближайшего известного типа PV.Разница между 2% и 10% определяет подтип и менее 2% - вариант [3]. Тринадцать типов BPV в настоящее время хорошо охарактеризованы и классифицируются на три различных рода - Delta, Epsilon и Xi, каждый из которых связан с поражениями эпителия специфической гистологической природы [4].

BPV-1 и -2 классифицируются как дельта-папилломавирусов [5]. Характерно, что эти типы вызывают появление фибропапиллом, связанных с привлечением субэпителиальных фибробластов [6].Насколько известно, оба типа также уникальны по своей способности инфицировать разные виды хозяев, не только крупного рогатого скота, вызывая саркоид лошадей [7]. Недавно был полностью секвенирован геном нового типа Delta-BPV (BPV-13) [8].

Большое количество типов BPV (-3, -4, -6, -9, -10, -11 и -12) относится к роду Xipapillomavirus . Эти вирусы считаются исключительно эпителиотропными, вызывая образование «настоящих папиллом» без участия фибробластов [9–11].С другой стороны, BPV-5 и -8 обладают потенциалом индуцировать как фибропапилломы, так и настоящие папилломы в ходе своего инфекционного цикла, и их классифицируют в третий род, Epsilonpapillomavirus [12, 13]. BPV-7 представляет собой исключение и классифицируется отдельно (беззнаковый род). Этот вирус был впервые выделен из кожного поражения папилломы, а также из образцов кожи здоровых сосков [14].

Тринадцать описанных типов BPV, а также другие предполагаемые типы были продемонстрированы методами молекулярной биологии, поскольку вирусы папилломы не склонны к репликации или восстановлению в культурах клеток [15–19].В соответствии с руководящими принципами, изложенными Номенклатурным комитетом папилломавирусов (14-я Международная конференция по папилломавирусам, Квебек, Квебек, Канада), было указано, что амплифицированные последовательности, выделенные из новых изолятов папилломавирусов, могут указывать только на предполагаемые новые типы PV - вместо типов PV. - поскольку ампликоны ПЦР представляют собой только часть гена L1 [15].

Использование ПЦР-анализов с вырожденными праймерами с последующим секвенированием позволило идентифицировать несколько типов PV у человека и других животных-хозяев [15, 20].Набор праймеров FAP для ПЦР был разработан из двух относительно консервативных областей, обнаруженных в гене L1, и было показано, что он амплифицирует ДНК PV как из папиллом, так и из здоровых тканей многих видов животных, включая BPV у крупного рогатого скота [15, 16, 20].

В Бразилии поголовье крупного рогатого скота составляет около 210 миллионов человек, и она является крупным экспортером мяса, молока и кожи. BPV ранее были обнаружены в Бразилии [21], но степень воздействия заболеваний, связанных с BPV, как на молочное животноводство, так и на стадо крупного рогатого скота, требует дальнейших исследований.Имеющиеся отчеты в разных регионах страны указывают на значительное разнообразие типов вирусов среди бразильского стада, что подразумевает очевидное бремя болезни [18, 22–25]. Таким образом, при разработке новых санитарных мер, направленных на предотвращение инфекции BPV и ее последствий, следует учитывать улучшение знаний о диагностике и связанных с ней клинических аспектах различных типов BPV среди бразильского стада.

К сожалению, эпидемиологические исследования BPV все еще ограничены доступностью высокопроизводительных диагностических методов, которые могли бы различать различные последовательности BPV одновременно в совместно инфицированных образцах [16, 26].В этом контексте настоящая работа представляет собой попытку идентифицировать типы BPV с использованием альтернативного метода скрининга, основанного на методе ПЦР-ПДРФ, и сопоставления гистологических данных анализируемых поражений с диагностированным вирусным типом.

2. Материал и методы

Создание RFLP in silico : профили расщепления FAP-сегмента L1 BPV-1–13 могут быть созданы с помощью резака NEB 2.0 [27] из всех полных нуклеотидных последовательностей L1, доступных в Genbank (http: // www.ncbi.nlm.nih.gov/genbank/). Сайты рестрикционных ферментов были выбраны как по их наличию (или отсутствию), так и по размерам сгенерированных фрагментов переваривания, чтобы дифференцировать эти тринадцать различных типов BPV. Гистопатологический анализ : биопсия бородавки была получена из ствола шестилетней молочной коровы голштинской породы, хронически пораженной кожным папилломатозом. Образцы из трех различных поражений были подвергнуты макроскопическому, гистологическому (окрашивание гематоксилином и эозином) и молекулярному анализу. Экстракция ДНК и ПЦР : ДНК экстрагировали из бородавок для вирусного типирования (ткань и клетки Illustra Genomic Prep Mini Spin GE Healthcare), и сегмент гена L1 приблизительно из 470 пар оснований амплифицировали с использованием следующих последовательностей праймеров: вперед: FAP59 ( 5'-TAA CWG TIG GIC AYC CWT ATT-3 ') обратный: FAP64 (5'-CCWATATCWVHCATITCICCATC-3'). ПЦР проводили с небольшими изменениями ранее описанного протокола [16]. Подробно реакции амплификации проводили в термоциклере Corbett CG1-96 (Corbett Life Science, Сидней, Австралия) с GoTaq Master Mix (Promega, Мэдисон, США) в следующих условиях: 5 мин при 95 ° C, затем 35 циклов по 1 мин и 30 с при 95 ° C, 2 мин при 52 ° C и 1 мин и 30 с при 72 ° C и заключительный этап удлинения 5 мин при 72 ° C. Рестрикционный анализ : аликвоту ПЦР-фрагментов подвергали реакциям переваривания для ПДРФ-анализа с четырьмя различными рестрикционными ферментами ( Dde I , Hinf I , Hind III , MsL I) в соответствии с инструкциями производителя (New England Biolabs, Ипсвич, США). Клонированные геномы BPV-1 и BPV-2, а также клинический образец с известным типом (тип Mg-19, тип BPV-2) использовали в качестве положительного контроля. Продукты ПЦР-ПДРФ анализировали в электрофорезе в 2,0% агарозном геле, окрашенном бромидом этидия (0.5 мкг мкг / мл) в буфере TAE и визуализировали в УФ-свете. Секвенирование : Аликвоты всех сгенерированных фрагментов ПЦР очищали с помощью экстракционных колонок (ДНК Illustra GFX PCR и набор для очистки гель-полосой GE Healthcare). Концентрацию и чистоту ДНК определяли на спектрофотометре (Eppendorf BioPhotometer, Гамбург, Германия) и подвергали реакциям секвенирования: для каждого фрагмента ПЦР проводили три независимых реакции секвенирования в генетическом анализаторе ABI377 PRISM (Life Applied Biosystems, США).Качество последовательностей ДНК проверяли и собирали перекрывающиеся фрагменты с помощью пакета BioEdit 7.0.9.0 [28]. Собранные последовательности с высоким качеством были выровнены с использованием ClustalW 1.83 [29] со штрафами за пропуски по умолчанию. Анализ гомологии был выполнен с использованием базы данных NCBI и BLAST [30]. Программное обеспечение BioEdit использовалось для идентификации эквивалентных аминокислотных последовательностей. Выравнивание последовательностей было выполнено с использованием программного обеспечения MEGA 5.0 [31], с использованием полного выравнивания и 2000 полных репликаций на начальной загрузке, чтобы обеспечить более высокий уровень достоверности нашего анализа [32]. Филогенетический анализ : сравнение нуклеотидных последовательностей филогенетических отношений проводили с помощью MEGA. Деревья, соединяющие соседей, были нарисованы с использованием TreeView версии 1.6.6 [33]. Нуклеотидные и аминокислотные последовательности из других типов BPV и HPV-16 были извлечены из GenBank (http://www.ncbi.nlm.nih.gov/) для сравнения с полученными здесь последовательностями.

Заявление об этике. Протоколы, использованные в этом исследовании, были одобрены Этическим комитетом экспериментов на животных Института зоотехнии (протокол №109 от 06 июля 2009 г.) по поручению Председателя Комитета. Были приложены все усилия, чтобы минимизировать страдания животных.

3. Результаты

Анализ in silico рестрикционных участков во фрагментах FAP L1 20 депонированных последовательностей BPV (от BPV-1 до BPV-13) не выявил внутритипных вариаций, связанных с относительными положениями разрезов для четырех используемых ферментов ( Таблица 1). Макроскопические и гистологические исследования определили собранные поражения как кожные фиброзные папилломы (рисунки 1 и 2).Из всех трех изученных поражений профиль RFLP двух (IZ1 и IZ3) предполагает наличие BPV-11. С другой стороны, образец гена IZ2 оценил профиль, который не мог соответствовать ни одному из тринадцати охарактеризованных вирусных типов (рисунок 3, таблица 1). В соответствии с этими результатами секвенирование ДНК и анализ BLAST IZ2 выявили редкий предполагаемый тип (BAPV-3), первоначально описанный в Японии [16]. Кроме того, секвенирование ДНК двух других образцов подтверждает их как недавно описанный BPV-11 [10].Эти последовательности были депонированы в GenBank (номера доступа: HQ435675 и HQ612180). Филогенетическая реконструкция с использованием этой частичной геномной последовательности позволила сравнить ее с другими последовательностями членов семейства Papillomaviridae (рис. 4).

БПВ-1 9018 9018 9018 9018 9018 9018 9018 9018 9 0179 9018 9018 9018 9018 9018 9017 9018 9018 9018 9018 9018 9018 9018 9018 9018 9018 9018 9018 9018 9018 9018 9018 90 183 63

L1 Фрагмент FAP Dde I Hinf I MsL
475 п.
БПВ-2 475 п. 319473 373473
154 9017 8 87
13

BPV-4 469 б.п. 182
87

BPV-5 469 bp 145
70

BPV-6 472 BPV-6 472 BPV-6 88 99

БПВ-7 484 п.н. 403 271 484 484
81 119
БПВ-8 469 п. бп 316 344469469
153 125

472
90 91 99

BPV-11 475 б.п.

BPV-12 469 п. 13 475 п.
Справочные последовательности:
BPV-1_NC_001522.1, БПВ-1_X02346.1, БПВ-2_M20219.1, БПВ-2_X01768.1,
БПВ-3_AF486184.1, БПВ-3_AJ620207.1, БПВ-3_NC_004197.1, БПВ-4_X05817.1,
БПВ-5. 1, BPV-5_NC_004195.1, BPV-6_AJ620208.1, BPV-7_DQ217793.1,
BPV-7_NC_007612.1, BPV-8_EB_DQ098917.1, BPV-8_NC_009752.1, BPV-9_AB331651. 1, BPV-11_AB543507, BPV-12_JF834523, BPV-13_JQ798171.

4. Обсуждение

Первоначально недавно охарактеризованный BPV-11 был описан с использованием консенсусного праймера Xipapillomavirus [10].Здесь можно было обнаружить тот же тип, использующий общий праймер FAP, что указывает на то, что этот набор является эффективной альтернативой для идентификации BPV. Помимо этого, мы описали одновременное присутствие двух типов BPV в трех разных образцах бородавок, полученных от хронически пораженного животного с диссеминированным папилломатозом.

Типизированные образцы BPV-11 и BAPV-3 имеют фиброзный аспект со сходной гистологией фибропапилломы, которая обычно не связана с исключительной инфекцией кератиноцитов, обычно приписываемой Xi BPV.В предыдущем сообщении [10] Хатама и другие обсуждали «неопределенную природу канцерогенности BPV-11», поскольку BPV-11 был впервые диагностирован при поражении фибропапилломы, в котором также был обнаружен BPV-1. Несмотря на возможные ограничения используемых диагностических методов, мы смогли обнаружить вирус одного и того же типа по крайней мере в двух разных поражениях, похожих на цветную капусту, с предполагаемым волокнистым ядром. В дополнение к отчету Хатамы, наши данные также связывают BPV-11 с кожными папилломами, что указывает на его патогенный тип.Кроме того, предполагаемый тип BAPV-3, описанный Огавой и другими [16], был обнаружен только один раз в образце папилломы кожи без гистологического описания, будучи генетически ассоциированным с BPV-3, -4 и -6 или Xi. БПВ.

Ген L1 имеет таксономическое значение из-за его высокой степени сохранности, доступ к которой можно получить с помощью общих наборов праймеров. В соответствии с этим сайты рестрикции, расположенные во фрагментах FAP, по-видимому, сохраняются без внутритипных вариаций используемых рестрикционных ферментов, что указывает на то, что филогенетические исследования, сравнивающие BPV и других членов семейства Papillomaviridae , возможны с использованием относительно короткой последовательности ДНК.

С начала девяностых годов методы, основанные на анализе ПЦР-ПДРФ в гене L1 вируса папилломы человека (ВПЧ), использовались для типирования вирусов и диагностики инфекций из различных источников, включая образцы шейки матки, свежие и залитые парафином ткани. [34, 35]. В частности, метод ПЦР-ПДРФ полезен для выявления коинфекций из-за его чувствительности и специфичности [36].

5. Заключение

Как простой, быстрый и экономичный анализ, ПЦР-ПДРФ представляет собой менее трудоемкий подход, чем клонирование и секвенирование ДНК, являясь альтернативой в качестве скринингового теста первой линии, как для диагностики уже классифицированного типа вируса, что указывает на необходимость секвенирования ДНК из-за смешанных и / или неизвестных профилей переваривания.В предыдущем исследовании, проведенном в штате Парана, Бразилия, Клаус и другие [26] предполагают, что возникновение множественной или смешанной инфекции BPV может широко распространяться среди бразильских стад крупного рогатого скота и может происходить в других географических регионах Бразилии. В согласии с тем, что наши результаты подтверждают эти результаты и подтверждают мнение о том, что множественные папилломавирусные инфекции со значительным патогенным потенциалом могут встречаться как у крупного рогатого скота, так и у человека-хозяина [26].

Насколько нам известно, карта ограничений, используемая здесь, является первой, созданной специально для проверки и типирования BPV.Наши результаты также указывают на повсеместное распространение ДПБ, поскольку два относительно редких, новых описанных типа ДПЖ, которые впервые были охарактеризованы в Японии, были также обнаружены в Бразилии.

Выражение признательности

Авторы выражают благодарность Ministério de Ciência, Tecnologia e Inovação / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq Proc. Superior Fund 402539 / 2011-7), Nacional Deordena do Desenvolvimento Administrativo (PAP-FUNDAP) за финансовую поддержку, а также Надю Хорхе Берриэль, Каролине да Пас Сабино и Джиму Хессону (http: // www.AcademicEnglishSolutions.com/) за редакционную поддержку.

Сетевой анализ временных рядов и долгосрочная краткосрочная память (LSTM) для прогнозирования плотности тока BPV

Биофотоэлектрические технологии (BPV) вызывают все больший интерес из-за их способности генерировать низкоуглеродную электроэнергию и химические вещества только из солнечного света и воды с использованием фотосинтетических микроорганизмов. Ключевым препятствием при разработке коммерческих биофотоэлектрических устройств является понимание пути электронов изнутри микроорганизма к электроду.Сложность конкурирующих клеточных метаболических реакций и адаптивных / временных физиологических изменений затрудняет разработку первопринципных моделей, помогающих в изучении пути электронов. В этой работе сезонная и трендовая декомпозиция с использованием сглаживания локально оцененной диаграммы рассеяния или LOESS (STL) применяется для разложения профиля плотности тока генерирующих электричество устройств BPV на их трендовые, сезонные и нерегулярные составляющие. Затем сеть с долговременной кратковременной памятью (LSTM) используется для прогнозирования плотности тока на один шаг вперед с использованием запаздывающих значений выхода и состояния освещения (включено / выключено).Сеть LSTM не может адекватно предсказать наблюдаемый профиль плотности тока, но адекватно предсказывает сезонную составляющую, управляемую светом, со средними абсолютными ошибками 0,007, 0,0014 и 0,0013 мкА · м −2 на обучающих, проверочных и тестовых наборах соответственно. Улучшенная производительность последнего объясняется удалением неровных рисунков. Дополнительный предиктор, выход флуоресценции биопленок, предлагается для улучшения прогнозов как наблюдаемой плотности тока, так и ее сезонной составляющей.Эта основополагающая работа по использованию сетей LSTM для прогнозирования плотности тока биофотоэлектрической энергии открывает двери для более быстрой и рентабельной оптимизации устройств, а также разработки программного обеспечения для управления этими устройствами.

Эта статья в открытом доступе

Подождите, пока мы загрузим ваш контент... Что-то пошло не так. Попробуйте снова?

Разработка долговечной двухвидовой биофотоэлектрической системы с ограниченным потоком электронов

Текущее производство в монокультуре

S.oneidensis MR-1

Двухкамерные электрохимические устройства (дополнительный рис. 14a, b) были использованы для оценки эффективности производства тока в монокультурах и микробных консорциумах в этом исследовании. Среду M9 (дополнительная таблица 1) с добавлением лактата использовали в качестве анодного электролита в монокультуре штамма MR-1. Сначала мы экспериментально подтвердили отсутствие катодных ограничений в наших установках - увеличение концентрации катодного акцептора электронов, феррицианида, более 50 мМ мало влияет на плотность тока, равно как и увеличение размера катода (дополнительный рис.1а, б). Уменьшение плотности тока в более поздний период было связано, главным образом, с постепенным потреблением лактата и снижением устойчивости биопленок.

Чтобы исследовать текущую продукцию штамма MR-1 на двух изомерах лактата, 15 мМ d-лактат, l-лактат или dl-лактат были использованы в качестве доноров электронов, соответственно. Результаты показали, что штамм MR-1 может производить ток на любом изомере, при этом плотность тока на d-лактате была немного выше, чем на l-лактате (дополнительный рис.2а). Это согласуется с предыдущими сообщениями о том, что штамм MR-1 обладает d- и l-лактатдегидрогеназами, ответственными за окисление лактата до пирувата 19 , и он предпочтительно использует d-лактат для роста 21 . Максимальная плотность тока положительно коррелировала с концентрацией d-лактата и достигала насыщения при концентрации d-лактата 5 мМ, а очевидный ток мог быть обнаружен при концентрации d-лактата всего лишь 1 мМ (дополнительный рисунок 2b, в). Поэтому мы с помощью генной инженерии создали цианобактерии для синтеза d-лактата путем введения гена d-лактатдегидрогеназы ldh в оба штамма Syn 2973 и Syn 2973- omcS .Полученный штамм Syn 2973- omcS - ldh , несущий ген omcS , продуцировал более высокую концентрацию d-лактата, чем штамм Syn 2973- ldh (дополнительный рисунок 3), но механизм еще предстоит изучить. Этот высокопродуктивный штамм d-лактата Syn 2973- omcS - ldh был выбран для создания микробного консорциума.

Создание внеклеточной среды для двух видов

На взаимодействия и функции популяций в микробном консорциуме сильно влияет внеклеточная среда 22 .Во-первых, необходимо разработать подходящую среду, удовлетворяющую потребности всех членов микробного консорциума 22 . Первоначально мы выбрали цианобактериальную среду BG11 (дополнительная таблица 1) в качестве кандидата. Однако штамм MR-1 не производил ток в BG11 (дополнительный рис. 4a). Мы определили, что буферные соли (Na 2 HPO 4 , KH 2 PO 4 ) из M9 необходимы для текущего производства штамма MR-1 (дополнительный рис. 5a). Буферные соли, вероятно, действуют на поддержание pH и осмотического давления, однако при добавлении буферных солей ток в BG11 все еще отсутствует (дополнительный рис.5а). Мы также определили, что два компонента из BG11, нитрат натрия и цитрат железа (III) аммония, серьезно тормозили текущее производство (дополнительный рис. 5b). Нитрат натрия и цитрат железа (III) аммония, вероятно, действуют как конкурентные акцепторы электронов штамма MR-1. Дальнейшие эксперименты подтвердили, что после удаления нитрата натрия и цитрата аммония и железа из BG11 и одновременного добавления буферных солей образуется нормальный ток (дополнительный рисунок 5c). Для цианобактерий удаление цитрата аммонийного железа и добавление буферных солей не вызывало явного дефекта роста (дополнительный рис.6а). Однако нитрат натрия является единственным источником азота в BG11 и не может быть удален. Поэтому мы решили использовать мутант нитратредуктазы (NapA) ( S. oneidensis- Δ napA ), который потерял способность восстанавливать нитрат 23 . Делеция napA не вызывала значительного дефекта роста (дополнительный рис. 6b), но снимала ингибирование нитратов (дополнительный рис. 5d). Таким образом, была создана модифицированная среда, подходящая для двух видов, которая получила название MBG11 (дополнительная таблица 1).

Мы попытались создать микробный консорциум с использованием MBG11. К сожалению, консорциум не производил ток на свету (дополнительный рис. 4b). Одна возможность заключалась в том, что электроны, высвобождаемые из S. oneidensis napA , будут захвачены кислородом, выделяющимся во время фотосинтеза. Мы действительно обнаружили, что растворенный кислород (DO) совместных культур на свету был намного выше, чем в темноте (дополнительный рис. 7a). Более того, штамм S. oneidensis napA чувствителен к свету, и гибель клеток наступает после освещения в течение 24 часов (дополнительный рис.7б). Повреждение, вызванное светом, также отражалось в увеличении внутриклеточных активных форм кислорода (АФК) и окислительно-восстановительного потенциала (ОВП) (дополнительный рис. 7c, d). Чтобы преодолеть эти проблемы, мы пришли к идее разработки организации пространственно-временного разделения для построения консорциума cyanobacteria- Shewanella (рис. 2). При организации временного разделения процесс зарядки (фотосинтетическое производство d-лактата) и процесс разряда осуществлялись последовательно в светлых и темных условиях соответственно, что позволяло осуществлять разряд в бескислородной и безосвещенной среде (рис.2а). При организации пространственного разделения цианобактерии и S. oneidensis культивировались в двух отдельных камерах, что позволяло изолировать S. oneidensis от света независимо (рис. 2b). Подводя итог, мы создали совместимую внеклеточную среду для двух видов, манипулируя ею на генетическом уровне, уровне среды роста и уровне устройства.

Рис. 2

Схематическое изображение трех установок, используемых для создания микробного консорциума. a Установка временного разделения.Процесс зарядки (фотосинтетическое производство d-лактата) и процесс разряда осуществляются последовательно в светлых и темных условиях соответственно. b Установка пространственного разделения. Цианобактерии и S. oneidensis культивируются в двух отдельных камерах, разделенных микропористой мембраной, которая обеспечивает одновременное протекание процессов зарядки и разрядки и позволяет защитить S. oneidensis от света. c Установка пространственно-временного разделения со средним пополнением.В культуру цианобактерий добавляется свежая среда MBG11. Это позволяет непрерывно производить d-лактат в цианобактериальной камере (слева), который используется для производства электроэнергии в анодной камере (справа). Здесь все катодные камеры опущены

Достижение высокой выходной мощности за счет временного разделения

Как описано выше, определенный фотосинтетически-экзоэлектрогенный микробный консорциум, состоящий из сконструированных цианобактерий ( Syn 2973- omcS -) ldh - ldh спроектированный S.oneidensis ( S. oneidensis- Δ napA ) был сконструирован в MBG11 посредством организации временного разделения (фиг. 2a и дополнительный фиг. 14d). На стадии зарядки штамм Syn 2973- omcS - ldh продуцировал приблизительно 300 мг · л -1 d-лактата в MBG11 в течение 96 часов, и он также рос лучше, чем штамм отрицательного контроля Syn . 2973- omcS (дополнительный рис. 8а, б). Затем штамм S. oneidensis- Δ napA был инокулирован в анодную камеру вместе с культурой штамма Syn 2973- omcS - ldh , чтобы сформировать микробный консорциум для процесса разгрузки, который действительно произвел ток около 300 мА · м −2 (рис.3а). Мы также подтвердили, что штаммы цианобактерий, несущие ген omcS , не производили значительного дополнительного тока в экспериментальной установке, использованной в этом исследовании (дополнительный рис.9), что исключало возможность прямого вклада гена omcS в ток производство. Таким образом, предполагаемый микробный консорциум cyanobacteria-d-lactate- Shewanella (CLS) был успешно разработан.

Рис. 3

Производительность временно разделенного микробного консорциума CLS. a Плотность тока, производимая двумя микробными консорциумами, включающими Syn 2973- omcS - ldh и S. oneidensis -WT или S. oneidensis- Δ napA , соответственно. b Устойчивость микробного консорциума CLS оценивали в среде MBG11 с различными концентрациями буферных солей. c Устойчивость микробного консорциума CLS оценивалась путем постепенного снижения плотности инокулированных клеток до S.oneidensis- Δ napA . d Эффективность преобразования энергии (d-лактат в электричество) микробного консорциума CLS с различной плотностью инокулированных клеток S. oneidensis- Δ napA . Все экспериментальные установки инкубировали в темноте. Планки погрешностей представляют собой стандартные отклонения от n = 3 независимых эксперимента. Исходные данные представлены в виде файла исходных данных

Устойчивость микробных консорциумов является важным фактором для поддержания их функции 24 .Для консорциума синтетических микробов надежность можно оценить по его устойчивости к колебаниям окружающей среды и восприимчивости к возмущениям, вызванным изменением плотности инокулированных клеток. Когда концентрация буферных солей была изменена с 1/5 до 1/20 от концентрации в M9, микробный консорциум CLS показал столь же высокие плотности тока (рис. 3b). Кроме того, после постепенного снижения плотности инокулированных клеток штамма S. oneidensis- Δ napA из OD 600 из 2.0–0,01, микробный консорциум CLS поддерживал функциональную стабильность при средней плотности тока, остающейся на уровне 280 мА · м -2 в течение по крайней мере 120 ч (рис. 3c). Эффективность преобразования энергии (d-лактат в электричество, η F ) этих систем BPV довольно высока и составляет от 50 до 60% (рис. 3d). Эти результаты продемонстрировали сильную устойчивость микробного консорциума CLS к экологическим и биологическим нарушениям. В последующих экспериментах мы выбрали концентрацию буферных солей, эквивалентную 1/5 концентрации M9, в качестве оптимальной концентрации (дополнительная таблица 1) и обозначили начальную OD 600 равной 0.1 в качестве оптимальной плотности инокулированных клеток штамма S. oneidensis- Δ napA .

Помимо надежности, микробный консорциум CLS эффективно преобразовал свет в электричество с превосходными характеристиками по сравнению с аналогами без d-лактата или аксениками с точки зрения производительности и стабильности (рис. 4). В оптимизированных условиях микробный консорциум CLS вырабатывал высокий и стабильный ток, который достигал 350 мА · м -2 и длился в течение 7 дней (рис.4а). Для сравнения, микробный консорциум без d-лактата, состоящий из штамма Syn 2973- omcs и штамма S. oneidensis- Δ napA (названный микробным консорциумом CS), мог производить только слабый ток около 120 мА · м −2 (рис. 4а). Примечательно, что плотность тока микробного консорциума CLS была намного выше, чем плотность тока монокультуры штамма S. oneidensis- Δ napA , дополненного равной концентрацией d-лактата (300 мг · л -1 ), что давало средний ток 150 мА · м −2 (рис.4а). Эффективность преобразования энергии (d-лактат в электричество, η F ) микробного консорциума CLS составила 69,5%, что намного выше, чем у 26,9% монокультуры с добавлением d-лактата. Разница в производительности между этими двумя системами может быть частично приписана тому, что дополнительные органические вещества были продуцированы штаммом Syn 2973- omcS - ldh , и эти органические вещества использовались S. oneidensis- Δ napA .С одной стороны, мы проанализировали спектр ВЭЖХ внеклеточных метаболитов штамма Syn 2973- omcS - ldh . Помимо d-лактата, который является доминирующим секретируемым метаболитом штамма Syn 2973- omcS - ldh , мы также обнаружили, что продуцировалось 20-30 мг · л -1 муравьиной кислоты (дополнительный рис. 8c). S. oneidensis может использовать муравьиную кислоту для текущего производства, что может частично объяснить наблюдаемое нами явление.С другой стороны, цианобактерии могут высвобождать свои эндогенно сохраненные соединения посредством ферментации в темноте и лизиса клеток во время процесса разгрузки 25 , что может предоставить больше субстратов для S. oneidensis- Δ napA в микробном консорциуме CLS. Эти результаты свидетельствуют о превосходстве микробного консорциума CLS в текущем производстве.

Рис. 4

Электрохимическая характеристика временно разделенных микробных консорциумов. a Плотность тока, произведенная консорциумом микробов CLS и его партнерами. Монокультура C представляет собой монокультуру Syn 2973- omcS - ldh , а монокультура S представляет собой монокультуру S. oneidensis- Δ napA . b Циклическая вольтамперометрия (CV) при низкой скорости сканирования 1 мВ · с -1 . c Поляризационные кривые, полученные из линейной вольтамперометрии (LSV) с низкой скоростью сканирования 0,1 мВ · с -1 .Напряжение на оси Y, представляет собой разность потенциалов между катодом и анодом. d Кривые мощности, полученные из поляризационных кривых. Планки погрешностей представляют собой стандартные отклонения от n = 3 независимых эксперимента. Исходные данные представлены в виде файла исходных данных.

Электрохимические характеристики были проведены для изучения эффективности переноса электронов и производительности микробного консорциума CLS и его аналогов. Циклическая вольтамперометрия (CV) с низкой скоростью сканирования применялась для выявления кинетики окислительно-восстановительных реакций на границе раздела ячейка-электрод 26 .Типичный окислительно-восстановительный пик биопленки S. oneidensis , начиная примерно с -0,4 В (по сравнению с Ag / AgCl), появился на кривых CV, и микробный консорциум CLS произвел самый высокий каталитический ток (рис. 4b). Поляризационные кривые, полученные из линейной вольтамперометрии (LSV), использовались для характеристики внутреннего сопротивления и максимальной плотности тока соответствующих систем. Результаты показали, что наклон кривой поляризации, полученной от микробного консорциума CLS, был наименьшим по сравнению с другими системами, что указывает на меньшее внутреннее сопротивление (рис.4в). Более того, максимальная плотность тока микробного консорциума CLS была близка к 1400 мА · м −2 (рис. 4c). Это значительное увеличение плотности тока при низких напряжениях можно объяснить двумя аспектами. С одной стороны, донор электронов был адекватным в микробном консорциуме CLS, и цианобактерии, окружающие биопленку S. oneidensis , могли продуцировать больше d-лактата. Таким образом, типичное ограничение диффузии 27 донора электронов может не существовать в микробном консорциуме CLS даже при низких напряжениях.С другой стороны, окисление доноров электронов будет ускоряться, и больше электронов будет передано аноду, когда потенциал анода увеличится на 28,29 , то есть когда напряжение будет близко к нулю В (см. Методы). Поэтому мы предположили, что процесс переноса электронов в микробном консорциуме CLS изменится с типичного диффузионного контролируемого режима на кинетический управляемый режим при низких напряжениях, что приведет к значительному увеличению плотности тока.Кривые мощности, полученные из поляризационных кривых, показали наивысшую удельную мощность 150 мВт · м -2 для микробного консорциума CLS (рис. 4d). Максимальная удельная мощность, полученная здесь, примерно на порядок выше, чем у устройств BPV без посредника с обычными конфигурациями (немикроминиатюризованный и не очень усовершенствованный анод) 5 . Эта выходная мощность составляет около одной трети максимальной выходной мощности BPV, о которой сообщалось на сегодняшний день 30,31 , которые были достигнуты за счет сочетания миниатюризации устройства, оптимизации конфигурации, оптимизации рабочих условий и использования материалов анода с высокой проводимостью.

Ввиду большого масштаба нашей установки, микробный консорциум CLS был дополнительно оценен путем постепенного увеличения размера анода с 2,5 × 2,5 см до 5,0 × 5,0 см. Результаты показали, что выходной ток улучшился, тогда как плотность тока уменьшилась вместе с увеличением анода, а максимальная плотность мощности обратно пропорциональна площади анода в этом диапазоне размеров (дополнительный рис. 10a – c). Эти результаты показали, что чем меньше размер анода, тем выше плотность тока и мощность, которые он производит.

Достижение большей выходной мощности за счет пространственного разделения

Для дальнейшей оценки производительности микробного консорциума CLS, микробный консорциум был сконструирован в трехкамерном устройстве под светом (дополнительный рис. 14e). В этой установке пространственного разделения цианобактерии и S. oneidensis культивировали в двух отдельных камерах, что позволило контролировать S. oneidensis в темноте независимо (рис. 2b). Микропористая мембрана между двумя камерами обеспечивает диффузию продуктов метаболизма, в основном d-лактата, но предотвращает миграцию двух видов микроорганизмов из одной камеры в другую (рис.2б). В то же время кислород, выделившийся из цианобактерий во время фотосинтеза, мог быть до некоторой степени изолирован микропористой мембраной, которая удерживала анодную камеру в микроаэробной среде. Этот пространственно разделенный микробный консорциум CLS был способен поддерживать длительную выходную мощность и, таким образом, поддерживать плотность тока около 200 мА · м −2 с плотностью мощности около 50 мВт · м −2 в течение более 12 дней (рис. 5а, б). Этот результат показал, что ограниченная пространственная структура стабилизировала микробное сообщество и обеспечила лучший экологический контроль для обоих микроорганизмов.

Рис. 5

Достижение большей выходной мощности с помощью пространственно разделенного микробного консорциума CLS. Цианобактерии и S. oneidensis были пространственно разделены, что позволяло одновременно производить d-лактат на свету и ток в темноте. a Плотность тока, создаваемая консорциумом микробов, созданным в условиях света или темноты (для камер цианобактерий). b Плотность мощности, полученная из кривых плотности тока.Анодные камеры, содержащие штамм S. oneidensis- Δ napA , всегда были защищены от света в течение всего экспериментального процесса для всех установок. Планки погрешностей представляют собой стандартные отклонения от n = 3 независимых эксперимента. Исходные данные представлены в виде файла исходных данных

Микробный консорциум CLS эффективно работал за счет синтрофического метаболизма, что отражалось не только в высокой эффективности выходной мощности, но и в устойчивом росте клеток.Гетеротрофный микроорганизм, штамм S. oneidensis- Δ napA , усиливал рост цианобактерий на 6-35% по сравнению с аксеническими культурами (дополнительный рис. 11). Стоит отметить, что усиление роста в микробном консорциуме CLS было гораздо более выраженным, чем в консорциуме CS (дополнительный рис. 11). Эти результаты дополнительно подчеркнули важность конкретного энергоносителя, который перенаправлял поток электронов для синтетического микробного сообщества.

Долгосрочная выходная мощность за счет пространственно-временного разделения

Применение системы BPV зависит не только от того, насколько высока выходная мощность, но также зависит от того, как долго и насколько стабильно работает система.Хотя период текущего производства был продлен за счет стабилизации микробного консорциума посредством пространственного разделения, выходная мощность все же снизилась до низкого уровня через 12 дней (рис. 5b). Возможно, это связано с тем, что клетки цианобактерий больше не производили d-лактат, что можно объяснить дефицитом минимальных питательных веществ.

Чтобы проверить эту гипотезу, мы разработали консорциум микробов CLS, разделенных пространственно-временным разделением, путем пополнения минимального количества питательных веществ для цианобактерий в двухкамерном устройстве (рис.2c и дополнительный рис. 14f). В этой установке свежую среду MBG11 добавляли в дополнительную бутылку, используемую для культивирования цианобактерий, при постоянной скорости потока около 50 мл · сут -1 . Затем цианобактериальную культуру доставляли в анодную камеру, содержащую S. oneidensis- Δ napA , при той же скорости потока для создания микробного консорциума и выработки тока. Между тем, анодный электролит также вытек из анодной камеры с той же скоростью потока.Процесс зарядки происходил в цианобактериальной бутылке, а процесс выгрузки происходил в анодной камере, которая составляет установку пространственно-временного разделения. Плотность клеток цианобактерий при OD 730 контролировалась в пределах от 3,0 до 4,0, что соответствовало плотности в пользу продукции d-лактата согласно предыдущему результату (дополнительный рисунок 8). Контролируя продукцию d-лактата на протяжении всего курса, концентрация d-лактата поддерживалась на уровне 2,5-4,0 мМ (рис.6), которого было достаточно для поддержания текущего производства S. oneidensis (дополнительный рис. 2c). Поразительно то, что эта проточная установка могла стабильно работать в течение более 40 дней при высокой плотности тока 240–380 мА · м –2 , обеспечивая существенно продолжительное производство тока (рис. 6).

Рис. 6

Достижение долгосрочной стабильной выходной мощности за счет пространственно-временного разделения микробного консорциума CLS со средним пополнением. Были показаны электрические выходы (плотность тока и плотность мощности) от микробного консорциума CLS.Концентрацию d-лактата в культуре цианобактерий измеряли в нескольких временных точках. В течение 0-13 суток в анодную камеру добавляли 5% среду LB. Начиная с 13-го дня, добавление среды LB уменьшилось до 1% (показаны красные стрелки). Плотность тока регистрировали каждые 20 мин. Данные, показанные на разных кривых, относятся к одному из экспериментов, каждый из которых содержит более 2800 точек данных. Исходные данные представлены в виде файла исходных данных

Первоначально в течение периода 0-13 дней в анодную камеру добавляли 5% среду LB с целью регенерации S.oneidensis и сохраняли свою активность, но плотность тока не была ни очень высокой, ни стабильной. Более того, мы наблюдали избыточный рост S. oneidensis в анодной камере и внутри соседних силиконовых трубок, что могло привести к потреблению большого количества d-лактата для его роста и дыхания, что уменьшило долю d-лактата, используемого для текущее производство. Поэтому мы эмпирически уменьшили добавление LB до 1% с 13-го дня и далее. Интересно, что производство тока постепенно восстанавливалось, и плотность тока поддерживалась на высоком уровне ~ 380 мА · м -2 в течение более 20 дней, стабильно (рис.6). Вероятно, что когда добавление LB уменьшилось с 5 до 1%, устойчивое состояние биопленки S. oneidensis было нарушено, и биопленку необходимо было реконструировать, чтобы достичь вновь установленного устойчивого состояния. Этот процесс длился семь дней, и профиль аналогичен процессу на начальном этапе (рис. 6, 0–3 дни), в течение которого плотность тока непрерывно увеличивалась вместе с постепенным формированием биопленки. Дальнейший эксперимент подтвердил, что добавление 1% LB вместо 5 или 0% может поддерживать плотность клеток на уровне S.oneidensis на стабильном уровне, тем самым стабилизируя текущее производство на более высоком уровне (дополнительный рис. 12a, b). Результаты показали, что когда добавление LB составляло 5%, плотность тока сначала увеличивалась, а затем начинала непрерывно снижаться, тогда как, когда добавление LB составляло 1%, плотность тока непрерывно увеличивалась (дополнительный рисунок 12a). Эта особенность может помочь нам лучше понять непрерывное увеличение плотности тока в течение 13–20 дней на рис. 6, когда добавка LB была уменьшена с 5 до 1%.Вероятно, более высокая и стабильная плотность тока также может быть частично приписана более высокой продукции d-лактата с 12-го дня и далее (рис. 6). Расчетная средняя плотность тока и средняя плотность мощности всего процесса достигли относительно высокого уровня около 320 мА · м −2 и 135 мВт · м −2 , соответственно (рис. 6). Это продемонстрировало, что когда клетки S. oneidensis стабильно удерживались в анодной камере, устойчивое производство d-лактата цианобактериями при пополнении среды могло привести к эффективному и долговечному выходу мощности в этой системе BPV на основе консорциума микробов CLS.

Ремоделирование внеклеточного матрикса при саркоиде лошади: иммуногистохимическое и молекулярное исследование | BMC Veterinary Research

  • 1.

    Borzacchiello G, Corteggio A. Конский саркоид: современное состояние. Иппология. 2009; 20: 7–14.

    Google ученый

  • 2.

    Насир Л., Брандт С. Болезни лошадей, ассоциированные с папилломавирусом. Vet Microbiol. 2013; 167 (Дополнение 1–2): 159–67.

  • 3.

    Torrontegui BO, Reid SJ.Клиническая и патологическая эпидемиология саркоида у лошадей в реферальной популяции. Eq Vet Educ. 1994; 6: 85–8.

    Артикул Google ученый

  • 4.

    Nasir L, Campo MS. Вирусы папилломы крупного рогатого скота: их роль в этиологии кожных опухолей крупного рогатого скота и непарнокопытных. Vet Dermatol. 2008; 19: 243–54.

    Артикул PubMed Google ученый

  • 5.

    Knottenbelt DC.Предлагаемая клиническая классификация саркоида у лошадей. Clin Tech in Eq Pract. 2005; 4: 278–95.

    Артикул Google ученый

  • 6.

    Tarwid JN, Fretz PB, Clark EG. Саркоид лошадей: исследование с упором на патологический диагноз. Компендируйте Contin Educ. 1985. 7: 293–300.

    Google ученый

  • 7.

    Martens A, De Moor A, Demeulemeester J, Peelman L. Анализ полимеразной цепной реакции хирургических границ саркоидов лошадей на ДНК вируса папилломы крупного рогатого скота.Vet Surg. 2001; 30: 460–7.

    Артикул CAS PubMed Google ученый

  • 8.

    Юань З., Гобейл П.А., Кампо М.С., Насир Л. Фибробласты саркоида лошади сверхэкспрессируют матриксные металлопротеиназы и являются инвазивными. Virol. 2010; 396: 143–51.

    Артикул CAS Google ученый

  • 9.

    Mosseri S, Hetzel U, Hahn S, Michaloupoulou E, Sallabank HC, Knottenbelt DC, et al.Саркоид лошади: демонстрация экспрессии матриксной металлопротеиназы in situ. Вет Дж. 2014; 202 (Дополнение 2): 279–85.

    Артикул CAS PubMed Google ученый

  • 10.

    Chambers G, Ellsmore VA, O’Brien PM, Reid SWJ, Love S, Campo MS, et al. Варианты последовательности бычьего папилломавируса Е5, обнаруженные при саркоиде лошадей. Virus Res. 2003. 96 (Дополнение 1–2): 141–5.

  • 11.

    Martens A, Moor ADE, Demeulemeester J, Ducatelle R.Патогистологические характеристики пяти клинических типов саркоида у лошадей. Res Vet Sci. 2000; 69 (Suppl3): 295–300.

  • 12.

    Cochrane AC. Модели in vivo заживления ран у лошади и роль факторов роста. Vet Dermatol. 1997. 8: 259–72.

  • 13.

    Hansen RR. Осложнения лечения ран у лошадей и дерматологической хирургии. Vet Clin Eq. 2009; 24: 663–96.

    Артикул Google ученый

  • 14.

    Хаддов А. Молекулярная репарация, заживление ран и канцерогенез: образование опухоли - возможное избыточное заживление? Adv Cancer Res. 1972; 16: 181–234.

    Артикул CAS PubMed Google ученый

  • 15.

    Дворак HF. Опухоли: незаживающие раны. Сходства между образованием стромы опухоли и заживлением ран. N Engl J Med. 1986; 315: 1650–9.

    Артикул CAS PubMed Google ученый

  • 16.

    Шефер М., Вернер С. Рак как заживающая рана: пересмотр старой гипотезы. Nat Rev Mol Cell Biol. 2008; 9 Дополнение 8: 628–38.

    Артикул PubMed Google ученый

  • 17.

    Имаидзуми Р., Акасака Ю., Иномата Н., Окада Е., Ито К., Исикава Ю. и др. Повышенная активация матричной металлопротеиназы (MMP) -2 в келоидных фибробластах и ​​повышенная экспрессия MMP-2 в областях пучка коллагена: влияние на механизмы развития келоидов.Histopathol. 2009; 54 (Дополнение 6): 722–30.

    Артикул Google ученый

  • 18.

    Пилчер Б.К., Думин Дж.А., Садбек Б.Д., Кран С.М., Велгус Х.Г., Паркс WC. Активность коллагеназы-1 необходима для миграции кератиноцитов на коллагеновой матрице I типа. J Cell Biol. 1997; 137: 1445–57.

    PubMed Central Статья CAS PubMed Google ученый

  • 19.

    Аллен Д.Л., Тейтельбаум Д.Х., Курачи К.Стимуляция фактора роста экспрессии матриксной металлопротеиназы и миграции и инвазии миобластов in vitro. Am J Physiol Cell Physiol. 2003; 284 Suppl 4: C805–15.

  • 20.

    Гиантин М., Аресу Л., Бенали С., Арико А., Морелло Е.М., Мартано М. и др. Экспрессия матриксных металлопротеиназ, тканевых ингибиторов металлопротеиназ и фактора роста эндотелия сосудов в опухолях тучных клеток собак. J Comp Pathol. 2012; 147 Прил. 4: 419–29.

  • 21.

    Осенковский П., Тот М, Фридман Р.Процессинг, шеддинг и эндоцитоз матричной металлопротеиназы мембранного типа 1 (MT1-MMP). J. Cell Physiol. 2004; 200 Приложение 1: 2–10.

  • 22.

    Borzacchiello G, Mogavero S, De Vita G, Roperto S, Della Salda L, Roperto F. Экспрессия рецептора активированного тромбоцитарного фактора роста бета, молекулярный анализ пути PI3K-AKT и трансформирующие сигналы в саркоидах лошадей. Vet Pathol. 2009; 46 Дополнение 4: 589–97.

  • 23.

    Brandt S, Tober R, Corteggio A, Burger S, Sabitzer S, Walter I, et al.Инфекция BPV-1 не ограничивается дермой, но также затрагивает эпидермис саркоидов лошадей. Vet Microbiol. 2011; 150 (Дополнение 1–2): 35–40.

  • 24.

    Chambers G, Ellsmore VA, O’Brien PM, Reid SW, Love S, Campo MS, et al. Связь вируса папилломы крупного рогатого скота с саркоидом лошади. J Gen Virol. 2003. 84: 1055–62.

    Артикул CAS PubMed Google ученый

  • 25.

    Мартенс А., Де Моор А., Дукатель Р. ПЦР-определение ДНК вируса папилломы крупного рогатого скота в поверхностных мазках и соскобах с саркоидов лошадей.Вет Дж. 2001; 161: 280–6.

    Артикул CAS PubMed Google ученый

  • 26.

    Оттен Н., фон Чарнер С., Лазари С., Антчак Д. Ф., Гербер Х. ДНК вируса папилломы крупного рогатого скота 1 и 2 типа в саркоидах лошадей: обнаружение ПЦР и прямое секвенирование. Arch Virol. 1993; 132: 121–31.

    Артикул CAS PubMed Google ученый

  • 27.

    Рид С.В., Смит К.Т., Джарретт В.Ф.Обнаружение, клонирование и характеристика папилломавирусной ДНК, присутствующей в саркоидных опухолях Equus asinus. Vet Rec. 1994; 135: 430–2.

    Артикул CAS PubMed Google ученый

  • 28.

    Borzacchiello G, Russo V, Della Salda L, Roperto S, Roperto F. Экспрессия тромбоцитарного рецептора фактора роста b и онкопротеинов вируса папилломы крупного рогатого скота E5 и E7 при саркоиде лошади. J Comp Pathol. 2008; 139: 231–7.

    Артикул CAS PubMed Google ученый

  • 29.

    Карр Е.А., Теон А.П., Мадуэлл Б.Р., Гриффи С.М., Хичкок М.Э. ДНК вируса папилломы крупного рогатого скота в неопластических и неопухолевых тканях, полученная от лошадей с саркоидом и без него в западных Соединенных Штатах. Am J Vet Res. 2001; 62: 741–4.

    Артикул CAS PubMed Google ученый

  • 30.

    Nasir L, Reid SW. Экспрессия гена папилломавируса крупного рогатого скота при саркоидных опухолях лошадей. Virus Res. 1999; 61: 171–5.

    Артикул CAS PubMed Google ученый

  • 31.

    Рэгланд В.Л., Спенсер Г.Р. Попытки связать вирус папилломы крупного рогатого скота с причиной саркоида у лошадей: лошадиные заражены внутрикожно вирусом папилломы крупного рогатого скота. Am J Vet Res. 1969; 30: 743–52.

    CAS PubMed Google ученый

  • 32.

    Yuan ZQ, Gault EA, Gobeil P, Nixon C, Campo MS, Nasir L. Создание и характеристика линий клеток фибробластов лошадей, трансформированных in vivo и in vitro с помощью BPV-1: модельные системы для саркоидов лошадей.Virol. 2008; 373: 352–61.

    Артикул CAS Google ученый

  • 33.

    Богерт Л., Мартенс А., Де Баере С., Гастуйс Ф. Обнаружение ДНК вируса папилломы крупного рогатого скота на нормальной коже и в привычном окружении лошадей с саркоидом лошади и без нее. Res Vet Sci. 2005; 79 Дополнение 3: 253–8.

  • 34.

    Yuan ZQ, Philbey AW, Gault EA, Campo MS, Nasir L. Обнаружение геномов вируса папилломы крупного рогатого скота типа 1 и экспрессии вирусных генов при воспалительных состояниях кожи лошадей.Virus Res. 2007; 124 (Дополнение 1-2): 245–9.

  • 35.

    Wobeser BK, Hill JE, Jackson ML, Kidney BA, Mayer MN, Townsend HG, et al. Локализация вируса папилломы крупного рогатого скота при саркоиде лошадей и воспалительных заболеваниях кожи лошадей с использованием лазерной микродиссекции и двух форм амплификации ДНК. J Vet Diagn Invest. 2012; 24 Дополнение 1: 32–41.

  • 36.

    Williams IF, Heaton A, McCullagh KG. Состав соединительной ткани саркоида лошади. Eq Vet J. 1982; 14 Suppl 4: 305–10.

  • 37.

    Бран Г.М., Гесслер У.Р., Хорманн К., Ридель Ф., Садик Х. Келоиды: современные концепции патогенеза (обзор). Int J Mol Med. 2009; 24: 283–93.

    Артикул CAS PubMed Google ученый

  • 38.

    Теорет С.Л., Олутой О.О., Парнелл Л.К., Хикс Дж. Обильная грануляционная ткань лошадиных сил и келоиды человека: сравнительное гистопатологическое исследование. Vet Surg. 2013; 42 Дополнение 7: 783–9.

  • 39.

    Ries C, Pitsch T, Mentele R, Zahler S, Egea V, Nagase H, et al.Идентификация новых видов проММП-9 массой 82 кДа, ассоциированных с поверхностью лейкозных клеток: (ауто) каталитическая активация и устойчивость к ингибированию ТИМП-1. Biochem J. 2007; 405 (Suppl3): 547–58.

  • 40.

    Мохан Р., Чинтала С.К., Юнг Дж. К., Вильяр В., МакКейб Ф., Руссо Л. и др. Матричная металлопротеиназа, желатиназа B (MMP-9) регулирует и влияет на регенерацию эпителия. J Biol Chem. 2002; 277: 2065–72.

    Артикул CAS PubMed Google ученый

  • 41.

    О’Тул Е.А., ван Конингсвелд Р., Чен М., Вудли Д.Т. Гипоксия индуцирует секрецию металлопротеиназы-9 матрикса эпидермальных кератиноцитов через путь протеинкиназы C. J. Cell Physiol. 2008; 214 Прил. 1: 47–55.

  • 42.

    Кляйн Т., Бишофф Р. Физиология и патофизиология матриксных металлопротеиназ. Аминокислоты. 2011; 41 (Дополнение 2): 271–90.

  • 43.

    Батлер П.Д., Лонгакер М.Т., Ян Г.П. Текущий прогресс в исследованиях и лечении келоидов. J Am Coll Surg. 2008; 206 Прил. 4: 731–41.

  • 44.

    Bergvall KE. Саркоиды. Ветеринарная клиника North Am Eq Pract. 2013; 29 (Дополнение 3): 657–71.

  • 45.

    Pascoe RR, Knottenbelt DC. Руководство Eq Dermatol pub. Лондон: У. Б. Сондерс; 1999. стр. 244–50.

    Google ученый

  • 46.

    Рестуччи Б., Мартано М., Майолино П. Экспрессия эндотелина-1 и рецептора эндотелина-1 в опухолях молочной железы собак. Res Vet Sci. 2015; 100: 182–8.

    Артикул CAS PubMed Google ученый

  • 47.

    Martano M, Carella F, Squillacioti C, Restucci B, Mazzotta M, Lo Muzio L и др. Экспрессия металлотионеина в опухолях кожных апокринных желез собак. Anticancer Res. 2012; 32 Дополнение 3: 747–52.

  • 48.

    Kleiner DE, Stetler-Stevenson WG. Количественная зимография: определение количества желатиназ в пикограммах. Анальная биохимия. 1994. 218 (2): 325–9.

    Артикул CAS PubMed Google ученый

  • Пуленепробиваемый жилет Патрика Лихи Партнерство | Обзор

    Партнерство Патрика Лихи по пуленепробиваемым жилетам (BVP), созданное в соответствии с Законом о грантах на партнерские отношения с пуленепробиваемыми жилетами 1998 года, представляет собой уникальный проект U.S. Инициатива Министерства юстиции, разработанная для предоставления критически важного ресурса правоохранительным органам штата и местным правоохранительным органам.

    ОДИН МИЛЛИОН ЖИЛЕТОВ: С 1999 года программа BVP предоставила более чем 13000 юрисдикций федеральные фонды на общую сумму 522 миллиона долларов на покупку более одного миллиона жилетов (1,441 013) по состоянию на ноябрь 2020 года.

    Финансовый год 2021 Период финансирования заявки BVP был открыт с 29 апреля 2021 года по 23 июня 2021 года.

    Объявлены награды BVP за 2020 финансовый год.См. Полный список наград BVP на 2020 финансовый год.

    Требования к регистрации в системе управления наградами (SAM): Юрисдикции должны быть зарегистрированы в SAM, чтобы получить доступ к фондам вознаграждений BVP на 2018-2020 финансовый год. Странам, не зарегистрированным в SAM, настоятельно рекомендуется как можно скорее получить доступ к веб-сайту SAM, чтобы получить информацию и завершить процесс онлайн-регистрации SAM. Для получения дополнительной информации о продлении и обновлении существующей регистрации SAM или регистрации в SAM в качестве новой организации посетите https: // fsd.gov / fsd-gov / answer.do? sysparm_number = KB0011081. В службу поддержки SAM можно позвонить по телефону 866-606-8220.

    Требования к документации: Получатели грантов должны хранить документацию для поддержки заявки на получение жилета BVP и запросов на оплату в течение как минимум трехлетнего периода.

    Другие федеральные фонды: Средства гранта на оказание помощи в области правосудия (JAG) или другие федеральные источники финансирования не могут использоваться для оплаты той части бронежилета (50%), которая не покрывается фондами BVP.JAG или другие федеральные фонды могут быть использованы для покупки жилетов для агентства, но они не могут использоваться в качестве 50% -ного соответствия для целей BVP.

    Требование об уникально подогнанном бронежилете - Юрисдикции, получающие финансирование для возмещения затрат на приобретение бронежилета, должны иметь требование об уникально подогнанном жилете при подаче заявок на BVP на 2019 финансовый год.

    В программе BVP «уникально подогнанные жилеты» означают защитные (баллистические или ударопрочные) бронежилеты, которые подходят индивидуальному пользователю для обеспечения наилучшего прилегания и защиты за счет комбинации: 1) панелей правильного размера и держателя. , определяется посредством соответствующих измерений, и 2) правильно отрегулированные ремни, ремни безопасности, застежки, клапаны или другие регулируемые элементы.Требование, чтобы бронежилет был «однозначно подогнан», не обязательно требует индивидуального изготовления бронежилета на основе измерений индивидуального пользователя. В поддержку усилий Управления программ правосудия по повышению безопасности офицеров Американское общество испытаний и материалов (ASTM) International сделало доступным Стандартную практику для измерения и подгонки бронежилетов для носителей бронежилетов (активный стандарт ASTM E3003). без каких-либо затрат. Контрольный список для оценки пригодности личной брони взят из ASTM E3003.

    Кроме того, в приложение 2019 (в системе BVP) был добавлен раздел сертификации, в котором говорится, что юрисдикции и правоохранительные органы осведомлены об этом требовании и будут соблюдать его.

    НОВИНКА! ОБНОВЛЕНИЕ Часто задаваемые вопросы об обязательной носке

    После двух лет снижения смертности сотрудников правоохранительных органов при исполнении служебных обязанностей в 2010 году в стране произошло резкое увеличение смертности сотрудников правоохранительных органов на 37%. 59 из 160 полицейских, убитых в 2010 году, были застрелены во время столкновений с применением насилия; на 20 процентов больше, чем в 2009 году.Министерство юстиции США стремится к повышению безопасности офицеров и провело исследования для анализа и анализа столкновений с насилием, а также случаев смерти и травм сотрудников правоохранительных органов. В связи с увеличением числа смертей сотрудников правоохранительных органов в сочетании с нашими возобновленными усилиями по повышению безопасности сотрудников, начиная с 2011 финансового года, для получения средств BVP юрисдикции должны подтвердить в процессе подачи заявки, что все правоохранительные органы, получающие выгоду из программы BVP имеют действующую письменную политику «обязательного ношения».Эта политика должна быть внедрена, по крайней мере, для всех офицеров в форме, прежде чем любое финансирование за 2011 финансовый год может быть использовано агентством. Нет никаких требований относительно характера политики, кроме того, что это обязательная политика ношения для всех офицеров в форме при исполнении служебных обязанностей. BJA настоятельно рекомендует агентствам проконсультироваться с Типовой политикой Международной ассоциации начальников полиции в отношении бронежилетов и тщательно рассмотреть все рекомендации, содержащиеся в этой политике. Об этом изменении политики объявил в октябре 2010 года генеральный прокурор после консультации с правоохранительным сообществом и получения от него комментариев.

    IACP очень щедро предоставил как свою Политику в отношении моделей бронежилетов, так и позиционный документ программе BVP. Чтобы получить копию Типовой политики и позиционного документа, юрисдикции должны быть зарегистрированы в программе BVP. Чтобы получить копию Типовой политики, обратитесь в Центр поддержки клиентов BVP по телефону 1-877-758-3787 или по электронной почте [электронная почта защищена].

    Для получения дополнительной информации об этом новом требовании программы BVP щелкните здесь.

    Рекомендации NIJ и уведомления о безопасности

    Действующий стандарт на бронежилеты Национального института юстиции 0101.06

    Знак сертификации NIJ

    NIJ Body Armor Standard 0101.06 Список жилетов

    NIJ Selection and Application Guide 0101.06 to Ballistic-Resistant Body Armour

    Этикетки бронежилетов: Когда сомневаетесь .... Проверьте это (Щелкните здесь, чтобы получить дополнительную информацию)

    Closed NIJ Advisory Notices and Safety Notices

    1-16-20: Консультативное уведомление NIJ:

    1-7-20: Уведомление о безопасности NIJ:

    6-18-19: Консультативное уведомление NIJ:

    6-3-19: Консультативное уведомление NIJ:

    2-27-19: Консультативное уведомление NIJ

    12-10-18: Консультативное уведомление NIJ

    29.11-18: Уведомление о безопасности NIJ № 01-2018:

    5-17-16: Уведомление о безопасности NIJ № 1-2016

    5-5-17: Уведомление о безопасности NIJ

    10-13-15: Уведомление о безопасности NIJ

    Предыдущее оповещение Национального института юстиции о доспехах

    2-25-16: Консультативное уведомление NIJ

    9-15-15: Консультативное уведомление NIJ

    8-27-15: Консультативное уведомление NIJ

    10-24-13: Консультативное уведомление NIJ

    6-28-13: Консультативное уведомление NIJ

    6-13-13: Консультативное уведомление NIJ

    4-17-13: Уведомление о безопасности NIJ

    Архив инициативы по безопасности бронежилетов

    ** Все контакты со СМИ следует направлять в Управление программ правосудия, Управление коммуникаций.

    Добавить комментарий

    Ваш адрес email не будет опубликован. Обязательные поля помечены *