Рисунок 2: Исследование жесткости кожи.

Тогда константа жесткости определяется как:

• (A) площадь поперечного сечения
• (л) это длина элемента
• (E) — модуль упругости

ПОЧЕМУ

Атомно-силовая микроскопия (АСМ) позволяет нам охарактеризовать упругие свойства биологических образцов, таких как кожа, до и после обработки активными ингредиентами или готовыми продуктами. Кантилевер со сферическим наконечником с радиусом кривизны в несколько мкм (кривая силы вдавливания) используется для измерения константы жесткости (k) в контакте с образцом кожи.

Модуль упругости определяется с помощью модели Герца, основанной на контакте образца со сферой.

Модуль упругости рассчитывается по формуле где :

• (F) – сила, действующая на объект под напряжением
• (E) — модуль Юнга (модуль упругости)
• (R) — радиус кривизны наконечника АСМ
• (δ) представляет собой предел прочности при растяжении или вдавливание, примененное к образцу
• (v) — коэффициент Пуассона * (здесь 0,3)

Эти данные позволяют эффективно измерять способность кожи сопротивляться упругой деформации. Это отличный инструмент, чтобы подчеркнуть влияние активных ингредиентов или рецептурных продуктов на жесткость кожи.

ЛЕКСИЧЕСКИЙ

• Деформация: изменение размера или формы объекта.
• Упругая деформация : временное изменение длины, объема или формы упругого вещества под действием напряжения.
• Эластин : высокоэластичный белок, присутствующий в соединительной ткани, который помогает коже возвращаться в исходное положение, когда ее протыкают или защемляют.
• Коллаген : наиболее распространенная структурная группа белков. Их основные функции заключаются в том, чтобы обеспечить в том числе и коже структуру и силу противостоять внешним воздействиям.
• Жесткость (или жесткость): степень, в которой объект сопротивляется деформации в ответ на приложенную силу (измеряется в Н/м).
• Коэффициент Пуассона : описывает расширение или сжатие материала в направлениях, перпендикулярных направлению нагрузки.

НИЧЕГО НЕ ПРОПУСТИТЕ

Следите за другими нашими новостями

Новости

Месяц осведомленности о раке поджелудочной железы подходит к концу, и что может быть лучше, чем закончить его хорошим чтением о воздействии табака на кожу? Если вы курите или даже планируете бросить, уверяем вас, эта статья поможет вам принять решение бросить курить

Подробнее

29 ноября 2022

Новости

Температура падает с каждым днем ​​все больше и больше, и мы часто забываем, что наша кожа нуждается в защите от этих климатических изменений. Если вы хотите, чтобы ваша кожа выглядела идеально этой зимой, не забудьте прочитать эту статью!

Подробнее

18 ноября 2022

Новости

Меньше значит больше становится все более и более источником вдохновения на многих рынках по всему миру. На этот раз мы говорим о рынке косметики и о том, как простота и многофункциональность стали важным фактом, который следует учитывать при создании формул их продуктов.

Подробнее

19 октября 2022 г.

Характеристики и модуль Юнга коллагеновых фибрилл из расширенной кожи с использованием анизотропного самонадувающегося расширителя тканей с регулируемой скоростью – Полный текст – Фармакология и физиология кожи 2016, Vol. 29, № 2

Механические свойства расширенной ткани кожи отличаются от нормальной кожи, что в основном зависит от структурно-функциональной целостности дермальных коллагеновых фибрилл. В настоящем исследовании оценивались механические свойства и топография поверхности расширенных и нерастянутых коллагеновых фибрилл кожи. Самонадувающиеся анизотропные расширители ткани с регулируемой скоростью помещали под кожу передних конечностей овец. Тканевые расширители постепенно увеличивались в высоту и достигали равновесия через 2 недели. Их оставляли на месте еще на 2 недели перед эксплантацией. Образцы расширенной и нормальной кожи были хирургическим путем взяты у овец (n = 5). Модуль Юнга и топографию поверхности коллагеновых фибрилл измеряли с помощью атомно-силового микроскопа. Топографическое сканирование поверхности показало организованные иерархические структурные уровни: молекулы коллагена, фибриллы и волокна. Не было обнаружено существенной разницы для рисунка D-полос: 63,5 ± 2,6 нм (нормальная кожа) и 63,7 ± 2,7 нм (расширенная кожа). Фибриллы из расширенных тканей состояли из рыхло упакованных коллагеновых фибрилл, и ширина фибрилл была значительно уже по сравнению с фибриллами из нормальной кожи: 153,9.± 25,3 и 106,7 ± 28,5 нм соответственно. Модуль Юнга коллагеновых фибрилл в растянутой и нормальной коже не был статистически значимым: 46,5 ± 19,4 и 35,2 ± 27,0 МПа соответственно. В заключение, анизотропный самонадувающийся тканевый экспандер с регулируемой скоростью продуцировал рыхло упакованную коллагеновую сеть, а фибриллы демонстрировали такие же характеристики D-полос, что и в контрольной группе на модели овец. Однако фибриллы из расширенной кожи были значительно уже. Жесткость фибрилл расширенной кожи была выше, но статистически не отличалась.

Введение

Расширение тканей кожи — это процедура, которая позволяет сформировать дополнительную ткань для использования в хирургической реконструкции. Самонадувающиеся тканевые экспандеры преодолевают ограничения, связанные с обычным силиконовым баллонным экспандером, который требует периодической инъекции физиологического раствора в баллон для медленного растяжения покрывающей его кожи и стимуляции роста [1]. Этот гидрогелевый экспандер поглощает жидкость организма, что приводит к постепенному набуханию устройства до определенного объема и размеров, растягивая прилежащую кожу и стимулируя рост [2,3]. Подобные устройства также использовались при хирургической реконструкции ожогов, рубцов [4,5] и расщелин неба [6]. Совсем недавно были введены анизотропные самонадувающиеся гидрогелевые расширители, в которых можно было контролировать направление расширения [2,3].

Механические свойства кожи зависят от структурных элементов трех основных слоев: эпидермиса, дермы и гиподермы. Каждый слой обладает различными свойствами, чтобы кожа могла выполнять свои физиологические функции. Однако исследования показали, что центральная роль дермального коллагена заключается в поддержании эластичности кожной ткани [7]. Эластичность дермы напрямую связана с расположением ее составляющих. Коллаген типов I и III в основном образуется в дермальном слое кожи. Коллаген состоит из определенных последовательностей аминокислот, образующих три переплетенные полипептидные цепи. Три полипептидные цепи скручены вместе, образуя спирали коллагена, известные как молекулы коллагена. Эти пучки молекул образуют нити коллагеновых фибрилл, которые собираются, чтобы стать коллагеновыми волокнами [8]. Фибриллы имеют цилиндрическую форму: диаметр в диапазоне 10-500 нм с периодическим полосчатым узором около 67 нм, известным как D-полосатость [9].]. Hodge и Petruska [10] впервые объяснили различные паттерны фибрилл через появление темных и ярких полос в их модели молекулы коллагена, названных областями разрыва и перекрытия соответственно. D-полосатость измеряется от длины перекрытия до области зазора.

Из-за особого иерархического уровня структуры коллагена было проведено множество экспериментов для изучения взаимосвязи между этими структурами и механическими свойствами ткани. Предыдущие исследования показали, что механическое поведение ткани зависит от коллагеновых фибрилл [11,12,13,14,15]. Информация о механических свойствах коллагена необходима не только для объяснения макроскопической биофизики различных тканей, но также может способствовать пониманию микроскопической структуры самих коллагеновых фибрилл.

Структурные свойства коллагеновых фибрилл широко изучались с помощью рентгеновской дифракции [11,12,16,17,18]. В последние годы были успешно проведены многочисленные исследования структурных и механических свойств биологических образцов на ультраструктурном уровне с использованием многофотонной визуализации генерации второй гармоники [19,20] и атомно-силовой микроскопии (АСМ) [15,21,22,23]. ,24,25,26,27,28,29,30]. Многофотонная микроскопия с генерацией второй гармоники — это метод визуализации, который позволяет изучать живую ткань in vivo, например анализ ткани кожи, без необходимости окрашивания и фиксации. При исследовании дермального коллагена этот метод использует интенсивность сигнала второй гармоники, генерируемого лазером, для получения изображений коллагеновых волокон, что позволяет качественно и количественно оценить их ориентацию, тип и распределение [19].,20].

Появление АСМ позволяет исследователям просматривать топографию поверхности образцов коллагена с высоким разрешением, исследуя силы взаимодействия между острым наконечником и поверхностью образца. Топография изображается путем постукивания по параллельным линиям на поверхности образца острым наконечником, закрепленным на конце кантилевера. Силовая спектроскопия является одним из режимов, доступных в АСМ для проведения механических испытаний, и этот режим выполняется после остановки изображения путем приближения и отвода кончика кантилевера от образца во время измерения взаимодействия между наконечником и образцом (прогиб кантилевера). 31].

Расширитель ткани широко используется в клинической практике для получения дополнительной ткани. Тем не менее, качество полученной расширенной ткани остается основной областью исследований [32,33,34]. В предыдущих исследованиях сообщалось о механических свойствах объемно расширенной ткани [35,36,37,38,39]. Однако, поскольку механическое поведение кожи зависит от коллагеновых фибрилл, это исследование было направлено на оценку топографии поверхности расширенной кожи и модуля Юнга ее коллагеновых фибрилл при использовании анизотропного самонадувающегося расширителя ткани с регулируемой скоростью.

Материалы и методы

Протокол животных

Этическое одобрение животных было получено от Институционального комитета по уходу и использованию животных (IACUC) Университета Путра Малайзия, Малайзия (R031/2013). В этом исследовании использовали взрослых самцов овец Дорпер (2 года) со средним весом 40 кг; 10 овец были отнесены поровну к контрольной и расширенной шкурным группам. Все хирургические манипуляции проводились под общей анестезией. Овцам вводили 10% кетамин (Pharmaniaga, Малайзия), а глубокую анестезию поддерживали 5% изофлураном (Piramal, Индия).

В этом исследовании использовались анизотропные самонадувающиеся тканевые экспандеры с регулируемой скоростью (Oxtex Ltd., Оксфорд, Великобритания) диаметром 20 мм и толщиной 3 мм. Экспандеры были изготовлены специально для этого исследования и предназначены для расширения с контролируемой скоростью в одном направлении в течение 2 недель. Операционное поле тщательно промывали 0,015% растворами хлоргексидина глюконата и 0,15% растворами цетримида (Baxter Healthcare Ltd., Великобритания). Подкожный карман формировали путем тупой диссекции без натяжения на расстоянии 5 мм от места разреза. Затем расширитель вставили и имплантировали в предварительно сформированный карман в дорсолатеральной области задней конечности (рис. 1а). Операционную рану ушивали узловыми швами викрил 5-0 (Ethicon Inc., Johnson & Johnson, Великобритания). Кроме того, три других шва были завязаны позади расширителя, чтобы предотвратить его смещение и закрыть мертвое пространство. Были сделаны базовые фотографии (рис. 1b) и рентгенограммы (рис. 2) расширенной группы кожи. За овцами наблюдали, и высоту имплантированного расширителя ткани измеряли и записывали ежедневно в течение 4 недель до эвтаназии.

Рис. 1

Нормальная кожа дорсолатеральной области передней конечности ( a ) и расширенная кожа ( b ).

Рис. 2

Рентгеновское изображение расширенной ткани кожи с желтым кружком (цвет только в онлайн-версии), иллюстрирующим положение расширителя ткани под кожей конечности.

Эвтаназию проводили пентобарбиталом. Растянутую кожу удаляли хирургическим путем (рис. 3а, б), быстро замораживали и хранили при -20°С. Толщину влажной кожи измеряли с помощью цифрового штангенциркуля (Mitutoyo, Япония) и готовили образцы для АСМ.

Рис. 3

a Деформированная расширенная кожа. b Расширение кожи при эксплантации.

АСМ-визуализация

Образец был срезан до толщины 50 мкм с помощью криостата (Leica, Германия), помещен на предметное стекло и промыт деионизированной водой при комнатной температуре перед визуализацией. Визуализацию и силовую спектроскопию выполняли с помощью АСМ NanoWizard® 3 (JPK Instruments, Германия) на ретикулярном слое дермы, так как этот слой состоит из плотно упакованных коллагеновых волокон. Кроме того, тестирование на ретикулярном слое вместо папиллярного снижает вероятность ошибочного постукивания по области эпидермиса. Первоначально образец наблюдали под микроскопом (TopViewOptics; JPK Instruments), прикрепленным к АСМ, и соответствующим образом регулировали для определения интересующей области, а кантилевер помещали непосредственно над этой областью. Для согласованной визуализации образцов при визуализации с постоянной силой 10 нН в воздухе использовался кантилевер контактного режима с резонансной частотой 13 кГц и жесткостью пружины 0,2 Н/м с радиусом кончика 0,01 нм. Во время визуализации наблюдались два окна канала: канал высоты соответствует топографии образца, а канал сигнала ошибки предназначен для прямого наблюдения за коллагеновыми фибриллами. Максимальная площадь сканирования в направлениях x и y составляла 10 × 10 мкм, а максимальная высота (диапазон z) — 7,5 мкм.

Атомно-силовая спектроскопия

Первоначально кантилевер был откалиброван путем проведения силовой спектроскопии на чистом предметном стекле с использованием режима диспетчера калибровки (NanoWizard®; программное обеспечение для обработки данных JPK SPM (JPK Instruments). Линейный наклон области контакта от силы кривая затем подгонялась для определения чувствительности Фактическая жесткость кантилевера была определена с использованием метода теплового шума Силовая спектроскопия была проведена на коллагеновых фибриллах, идентифицированных по топографическому сканированию путем создания 10 точек на областях перекрытия фибрилл. Для каждой точки строились кривые для измерения модуля Юнга. Максимальную нагрузку регулировали в соответствии с шероховатостью фибриллы, чтобы глубина вдавливания была достаточно малой, чтобы избежать влияния нижележащего субстрата.

Обработка данных

Все изображения и данные силовой спектроскопии были обработаны с использованием программного обеспечения для обработки данных JPK SPM (JPK Instruments). Изображения были отфильтрованы для получения более качественных изображений, а данные силовой спектроскопии были обработаны для расчета модуля Юнга (E) .

Измерение D-диапазона и ширины коллагеновых фибрилл

Характеристики D-диапазона определяли путем измерения длины промежутков и областей перекрытия коллагеновых фибрилл [15]. Поверхности сначала визуализировали в области сканирования 10 × 10 мкм, чтобы идентифицировать рисунок коллагеновых фибрилл, а затем повторно сканировали с более высоким разрешением с областью сканирования 5 × 5 мкм. D-полосатость и ширину коллагеновых фибрилл измеряли, как описано Janko et al. [28]. D-полосу измеряли вдоль продольной оси коллагеновых фибрилл, а расстояние между долинами трех волн полной ширины из профиля поперечного сечения измеряли и делили на три для получения D-полосы. Ширину одиночных коллагеновых фибрилл измеряли перпендикулярно продольной оси фибрилл. По профилю поперечного сечения измеряли ширину фибрилл в пересчете на длину одной волны.

Определение модуля Юнга

Модуль Юнга был получен путем подгонки области контакта силовой кривой с использованием модели Герца. Модель аппроксимирует образец как анизотропное и линейно-упругое твердое тело. Кроме того, предполагалось, что индентор не деформируется и отсутствуют дополнительные взаимодействия между образцом и острием. Консоль подчиняется закону Гука, F = kx , где F — сила, действующая на образец, k — жесткость кантилевера и k .0243 x – это его отклонение. Учитывая использование в этом эксперименте параболоидного наконечника 0,01 нм, модуль Юнга для каждой кривой был рассчитан по следующему уравнению:

, где соответствующие значения прогиба кантилевера и z-пьезоудлинения в точке контакта, E — модуль Юнга, v — коэффициент Пуассона и R — радиус наконечника.

Все изображения и данные силовой спектроскопии были обработаны с использованием программного обеспечения JPK SPM Data Processing (JPK Instruments).

Статистический анализ

Собранные данные были проанализированы с использованием критерия Стьюдента (версия SPSS 22.0) с доверительным интервалом 95%. Нормальное распределение наборов данных было подтверждено с помощью теста Шапиро-Уилка.

Результаты

Степень набухания расширителя тканей

На рис. 4 показана степень набухания расширителя тканей, регистрируемая ежедневно в течение 4 недель. На графике видно, что тканевый расширитель постепенно увеличивался в высоту и достиг равновесия через 2 недели. Рисунок 1b и эти результаты подтвердили, что расширитель ведет себя анизотропно с регулируемой скоростью, как это предусмотрено производителем. После достижения равновесия расширители тканей оставляли на месте еще на 2 недели перед эксплантацией.

Рис. 4

Коэффициент набухания расширителя тканей в зависимости от количества дней.

Топография поверхности

Коллагеновые фибриллы, по-видимому, были уложены в корзинчатую структуру для обеих групп, как показано на рисунке 5. Кроме того, было замечено, что сети коллагена перекрывают друг друга. Нормальная кожа состоит из плотно упакованных коллагеновых фибрилл, которые накладываются друг на друга. Напротив, расширенная кожа состоит из рыхлой сети коллагеновых фибрилл.

Рис. 5

Типичные АСМ-изображения нормальной ( a ) и расширенной ( b ) кожи.

D-полосатость коллагеновых фибрилл

В таблице 1 приведены средние значения и стандартное отклонение D-полосатости, измеренные для более чем 50 коллагеновых фибрилл для обеих групп. Для расширенных образцов кожи (рис. 6) топографический анализ вдоль продольной оси (линия AB) коллагеновых фибрилл показал среднее значение D-полосы 63,7 ± 2,7 нм, в то время как картина D-полосы нормальной кожи составила 63,5 ± 2,6 нм. Значимой разницы между группами не наблюдалось.

Таблица 1

D-полоса, ширина и модуль Юнга коллагеновых фибрилл, взятых из нормальной и расширенной кожи 3 мкм). b Типичный профиль фибрилл, измеренный по линиям AB и CD.

Для расширенного образца кожи ширина, измеренная по линии CD (рис. 6), дала среднюю ширину 106,7 ± 28,5 нм. Для сравнения, средняя ширина коллагеновых фибрилл в нормальной коже составляет 153,9 мм.± 25,3 нм. Ширина коллагеновых фибрилл в обеих группах статистически не различалась (p < 0,05; табл. 1).

Атомно-силовая спектроскопия

Для силовой спектроскопии нормальной и расширенной кожи было построено более 60 кривых. На рис. 7 представлены отпечатки по одной точке для каждого из образцов нормальной и расширенной кожи для определения модуля Юнга в режиме «подхода». Модуль Юнга коллагеновых фибрилл для нормальной кожи составил 35,2 ± 27,0 МПа, а для расширенной кожи — 46,5 ± 19 МПа..4 МПа (таблица 1). Однако существенной разницы между группами не было.

Рис. 7

Типичная кривая сила-расстояние, записанная в одной точке для нормальной и расширенной кожи. Определение модуля Юнга проводилось в режиме «сближения».

Обсуждение

Из качественных и количественных данных видно, что имплантированный тканевый экспандер растягивал кожу и, следовательно, коллагеновые фибриллы. Считается, что растяжение фибрилл обусловлено вязкоупругими свойствами коллагеновых фибрилл [16,27,29].]. Когда применяется стресс, перестройка структурных волокон коллагена может происходить тремя различными способами: распрямление самих молекул коллагена, скольжение молекул коллагена друг относительно друга или вытеснение молекул воды из фибрилл, что приводит к реорганизации воды. сеть. Фрацль и др. [17] сообщили, что увеличение D-полос происходит при более высокой деформации из-за растяжения тройных спиралей коллагена.

Изначально в биологическом равновесии кожа находится в состоянии покоящегося напряжения [40]. Кроме того, коллагеновые фибриллы располагаются плотным и извитым узором. По мере того, как тканевый расширитель постепенно надувается и растягивает кожу, фибриллы начинают перестраиваться параллельно друг другу, чтобы противостоять деформации. По мере того как коллагеновые фибриллы пытаются выровняться и стать более прямыми, напряжение покоя увеличивается. В результате он становится более жестким и имеет более высокий модуль Юнга [40]. Было обнаружено, что модуль Юнга коллагеновых фибрилл находится в диапазоне 0,1–11,5 ГПа [14, 27, 30], что согласуется с данными настоящего исследования, хотя и ближе к нижнему пределу. Основные различия могут быть связаны с тем фактом, что в настоящем исследовании использовалась техника наноиндентирования, которая представляет собой модуль Юнга поверхности, а не объемную одномерную жесткость на растяжение вдоль оси коллагеновых фибрилл, как сообщает Graham et al. [27] и Эппелл и соавт. [14]. Кроме того, разница между нынешними значениями и предыдущими результатами также может быть связана с разным происхождением тестируемого коллагена.

Одним из ограничивающих факторов в этом исследовании является большое стандартное отклонение модуля Юнга для обеих групп. Этого следует ожидать от образцов биологических тканей, во-первых, потому что между самими овцами могут возникать различия. В период расширения некоторые овцы могут быть более активными, чем другие. Таким образом, существует небольшая вероятность того, что действия могут повлиять на характеристики кожи. Действия, вероятно, вызывают различную чувствительность кожи к условиям теста, например, некоторые ткани становятся более жесткими, чем другие. Увеличение количества овец, вероятно, может уменьшить стандартное отклонение. Однако при использовании млекопитающих высших видов используемое количество всегда является ограничивающим фактором.

Во-вторых, вариабельность между отдельными коллагеновыми фибриллами может быть сопутствующим фактором, как предположили Wenger et al. [30]. Кроме того, они также сообщили, что механические свойства коллагеновых фибрилл зависят от направления силы, используемой во время тестирования: либо перпендикулярно, либо аксиально по отношению к фибриллам. Однако о значении модуля Юнга не сообщается. В настоящей работе сила дважды прикладывалась перпендикулярно коллагеновым фибриллам в 10 различных точках вдавливания. Большое стандартное отклонение, вероятно, можно устранить, увеличив количество и частоту точек отступа. В-третьих, при выборе фибрилл одинакового размера возникают трудности из-за их сложного расположения сети, поэтому иногда сложно получить четкий профиль. Поэтому были выбраны фибриллы разного диаметра, что приводило к большим вариациям модуля Юнга. Свенссон и др. [41] предположили, что более крупные фибриллы создают более высокий модуль.

Расширение ткани зависит от вязкоупругости кожи, чтобы увеличить площадь поверхности в ответ на внутренние и внешние силы [42]. Предыдущие исследования предполагали, что увеличение площади поверхности ткани после расширения является результатом образования новой ткани в результате явления, называемого механической ползучести [43,44,45]. Это явление дополнительно подтверждается Wilhelmi et al. [46], которые предположили, что механическая ползучесть обусловлена ​​удлинением кожи за пределы ее естественного растяжения, например, в технике предварительного наложения швов. Кроме того, они также предположили, что расширение ткани является следствием биологического ползучести, образования новой ткани из-за постоянной хронической силы растяжения. Основываясь на степени набухания расширителя ткани с течением времени (рис. 4), мы предположили, что механическое сползание происходило в течение первых 2 недель после имплантации, поскольку кожа постепенно растягивалась с постоянной силой с течением времени. На этом этапе механическая ползучести увеличивает площадь поверхности кожи из-за вязкоупругой природы кожи без образования новой ткани. Напротив, при достижении равновесия (период поддержания) кожа, скорее всего, восстановит свои биомеханические свойства. Это предложение также поддерживают Zeng et al. [38]. Образование новой ткани в этот период может восстановить биомеханические свойства кожи. Однако для подтверждения этой гипотезы необходимы гистологические исследования.

Сообщается, что хирургические операции вызывают воспалительную реакцию и генерируют огромное количество свободных радикалов, которые могут повредить коллагеновые волокна, как сообщают несколько авторов [47,48]. В настоящем исследовании надрез был сделан на расстоянии 5 см от области имплантации. Эта процедура была проведена для уменьшения воспаления в области имплантации. Это также было сделано, чтобы уменьшить любое влияние на текущий синтез и разрушение коллагена, ремоделирование внеклеточного матрикса вокруг разреза во время процесса заживления, что может быть искажающим фактором в результатах исследования [49].]. Этот метод также сводит к минимуму натяжение раны, вызванное расширением ткани, что может привести к несостоятельности швов и расхождению раны.

Заключение

Анизотропный самонадувающийся расширитель тканей с регулируемой скоростью успешно расширил кожные ткани на модели овцы. Это новое устройство расширялось ортотропно, и его влияние на коллагеновые фибриллы показало, что D-образная полоса существенно не изменилась по сравнению с контрольной группой. Было замечено, что коллагеновые фибриллы выровнены в направлении основного окрашивания, и фибриллы были значительно уже. Увеличение жесткости фибрилл после растяжения не было статистически значимым.

Благодарности

Это исследование было поддержано грантом Министерства образования Малайзии (UM.C/625/1/HIR/MOHE/DENT/21). Авторы также хотели бы поблагодарить Oxtex Ltd. за предоставление последнего поколения анизотропных самонадувающихся расширителей тканей с регулируемой скоростью.

Заявление о раскрытии информации

Все авторы заявляют об отсутствии конфликта интересов при проведении исследования.

Авторское право: Все права защищены. Никакая часть данной публикации не может быть переведена на другие языки, воспроизведена или использована в любой форме и любыми средствами, электронными или механическими, включая фотокопирование, запись, микрокопирование или любую систему хранения и поиска информации, без письменного разрешения издателя. .
Дозировка препарата: авторы и издатель приложили все усилия, чтобы гарантировать, что выбор препарата и дозировка, указанные в этом тексте, соответствуют текущим рекомендациям и практике на момент публикации. Тем не менее, в связи с продолжающимися исследованиями, изменениями в правительственных постановлениях и постоянным потоком информации, касающейся лекарственной терапии и реакций на лекарства, читателю настоятельно рекомендуется проверять вкладыш в упаковке для каждого лекарства на предмет любых изменений в показаниях и дозировке, а также для дополнительных предупреждений. и меры предосторожности. Это особенно важно, когда рекомендуемый агент является новым и/или редко используемым лекарственным средством.
Отказ от ответственности: заявления, мнения и данные, содержащиеся в этой публикации, принадлежат исключительно отдельным авторам и участникам, а не издателям и редакторам. Появление рекламы и/или ссылок на продукты в публикации не является гарантией, одобрением или одобрением рекламируемых продуктов или услуг или их эффективности, качества или безопасности.